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上海岑特生物科技有限公司 主营产品:ELISA试剂盒,质粒定制,各种动物血清,酶联免疫试剂盒,白介素试剂盒,标准品对照品,培养基,抗体,细胞株,微生物,染色液溶液,实验耗材

第10年

当前位置: 阿仪网 > 上海岑特生物科技有限公司 > 产品展示 > 生化试剂 > 生化试剂 > DEAE-纤维素DE-52使用说明

DEAE-纤维素DE-52使用说明

价格:¥电议

品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/11/8 9:06:47

产品摘要:DEAE-纤维素DE-52使用说明,纤维素DE-52为中等碱性阴离子交换剂,柱层析用于吸附剂,用以分离提纯多糖、肽、核苷酸、酶、血清组分和病毒等各种生物高分子。

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详细内容

上海岑特生物科技公司是国内elisa试剂盒优质供应商,岑特供应DEAE-纤维素DE-52使用说明,代理销售不同elisa试剂盒品牌的进口/国产elisa试剂盒,专业供应科研实验所需的培养基,抗体,动物血清血浆,标准品对照品,化学试剂,酶联免疫试剂盒,白介素试剂盒,金标检测试剂盒,微生物,蛋白质,ELISA种属涵盖广,凭借多年行业经验,完善的售后服务,高质量的产品。欢迎来电咨询。

中文名:纤维素DE-52

英文名:DEAE Cellulose DE-52

供应商:上海岑特

性状:干燥细结晶或纤维状

基质 :高度交联纤维素

配基 :二乙基氨基乙基

配基密度 :40μmol /ml

吸附载:180mg HSA/ml

填料的颗粒大小: 50μm

最大流速 :300cm/h

pH范围 :3-10,在位清洗时pH范围可到2-11

化学稳定性 :各种缓冲液及盐,0.5M NaOH及醋酸,8M脲,6M盐酸胍,乙醇,异丙醇等

物理稳定性 :0.1M中性缓冲液中,120℃30min

作用:提纯多糖、肽、核苷酸、酶、血清

纤维素DE-52为中等碱性阴离子交换剂,柱层析用于吸附剂,用以分离提纯多糖、肽、核苷酸、酶、血清组分和病毒等各种生物高分子。


纤维素DE-52提取法纯化多克隆抗体,该法提取IgG简便,既可小量提取,也可大量制备。

1.批量提取法 称取DEAE-纤维素(DE52)50g,置于1000ml烧杯中,先以蒸馏水漂浮除去细颗粒,再经酸碱处理后,用0.01~0.05mol/L,pH8.0左右的磷酸盐缓冲液(PB)平衡。将水分抽干,或用布氏滤斗(内放两层滤纸)过滤,收集湿纤维素,以降低其离子强度。按1ml血清加湿重5g DE52,经过充分搅拌,置4℃吸附1h。上清液可再如此处理一次,即获得较纯的IgG。该法提取IgG简便,既可小量提取,也可大量制备。

2.Tris-Cl离子交换层析法(Ion-exchange chromatography)

DEAE-纤维素DE-52使用说明 【材料和试剂】

(1)DE52纤维素。

(2)HCl;NaOH;0.01~0.05mol/L,pH8.0 PB;0.01mol/L,pH8.6 Tris-Cl;0.5mol/L NaCl。

(3)待纯化标本:杂交瘤腹水或培养上清,免疫血清或饱和硫酸铵粗提品。

(4)1.5×50cm 层析柱;透析袋;紫外分光光度计及其他透析和层析所需的试剂和器材。

DEAE-纤维素DE-52使用说明【操作步骤】:

(1)DE52纤维素的处理:DE52经酸、碱处理,0.01mol/L,pH8.6 Tris-Cl平衡。

(2)装柱:将层析柱固定于滴定架上,柱底垫一圆形尼龙纱,出口接一细塑料管并关闭出水。将浸泡于0.01mol/L,pH8.6 Tris-Cl中的DE52沿玻璃棒倒入柱中,待DE52自然沉降3~5cm高时,吸除0.01mol/L,pH8.6 Tris-Cl,或松开出水口螺旋夹,控制流速1~2ml/min,同时连续加入DE52至所需高度。待DE52完全沉降后,柱面放一圆形滤纸片。

(3)平衡:松开出水口螺旋夹,以0.01mol/L,pH8.6 Tris-Cl平衡,控制流速为15滴/min,待流出液与洗脱液之pH值达到一致时,停止平衡。

(4)待提取样品的准备:将蛋白装入透析袋里,置4℃冰箱,对0.01mol/L pH8.6 Tris-Cl透析。

(5)加样、洗脱与收集:用吸管吸去柱面液体,以毛细吸管沿柱壁加入样品,样品体积相当于柱床体积的1%~2%,蛋白浓度为50~70mg。启开出水口螺旋夹使样品缓慢进入柱床内,并用少量洗脱液清洗柱壁;待液体进入柱床后,以0.01mol/L,pH8.6 Tris-Cl洗脱,控制流速为14~16滴/min。分部收集器收集,紫外监测,或人工收集,以紫外分光光度计分别测定每管280nm OD值,描绘洗脱液峰。

(6)浓缩:将洗脱液的280nm OD上峰段与下峰段各管分别合并,装入透析袋,以PEG浓缩至所需体积。

Tris-PO4离子交换层析法

该法在上述方法的基础上稍加改良,即通过梯度洗脱,可用于血清中IgG和IgM的提取。

DEAE-纤维素DE-52使用说明【材料和试剂】

(1)DE52纤维素。

(2)待纯化标本:杂交瘤腹水或培养上清,免疫血清或饱和硫酸铵粗提品。

(3)1.5×50cm 层析柱;透析袋及其他透析和层析所需的试剂和器材。

(4)梯度洗脱液包括:0.005 mol/L,pH8.6 Tris-PO4;0.055mol/L,pH6.0 Tris-PO4;。5mol/L,pH5.1 Tris-PO4。

【操作流程】:

(1)蛋白标本对0.005mol/L,pH8.6 Tris-PO4透析。

(2)DE52装柱,并以0.005mol/L,pH8.6 Tris-PO4平衡。

(3)加样,以0.005mol/L,pH8.6 Tris-PO4洗脱,紫外监测直至洗脱液280nm OD回到基线。这一步骤可除去血清中其他蛋白。

(4)以350ml 0.055mol/L,pH6.0 Tris-PO4洗脱,这一步骤可用于纯化血清IgG和IgM。

(5)以125ml 0.055mol/L,pH6.0 Tris-PO4和125ml 0.5mol/L,pH5.1 Tris-PO4梯度洗脱,总量收集250ml;重复步骤(5)。

(6)根据280nm峰值合并蛋白峰,透析浓缩和保存同上。

用过的DE52可用0.01mol/L,pH8.6 Tris-Cl和0.5mol/L NaCl、0.01mol/L,pH8.6 Tris-Cl梯度洗脱回收。再用蒸馏水洗至中性,加入0.02%叠氮钠于4℃保存备用。

DEAE-纤维素DE-52使用说明 订购说明:

1.现货直销,当天下单,当天发货。

2.产品优质,到货快,免费快递。

3.售前、售中、售后服务好。

DEAE-纤维素DE-52使用说明 注意事项:

一般都用药匙取用。药匙的两端为大小两个匙,分别取用大量固体和少量固体。

试剂一旦取出,就不能再倒回瓶内,可将多余的试剂放入指定容器。

称量的天平应保持清洁、干燥,避免潮湿及腐蚀性气体的侵蚀。在进行称量操作时,被称取的试剂应置于称量纸上或其它器皿内,不可在盘中直接称量。

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热门标签:DEAE-纤维素DE-52,纤维素DE-52

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