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MMLV逆转录酶活性检测试剂盒(RT-PCR法)
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详细内容
产品英文名称:MoMLV Reverse Transcriptase Assay Kit(RT-PCR)
产品分类:酶学检测
纯度/规格:50T
本试剂盒适用于各种RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用M-MLV进行反转录反应,能够获得较长的反转录产物。同时,在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中,还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配制的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的M-MLV,所以cDNA更长,基因的信息保留得更完整!反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
反转录反应需通过多个步骤来合成cDNA。反转录酶表现出多种不同的生化活性,主要是 RNA 依赖性 DNA聚合酶活性和 RNase H活性。先,在有退火引物的情况下,反转录酶与RNA模板结合。接下来,酶的RNA依赖性 DNA 聚合酶活性通过掺入反应混合物中的dNTP来合成cDNA。反应生成得到 cDNA:RNA 杂合链,此过程被称为第一链 cDNA合成。如果反转录酶具有 RNase H活性(比如野生型 M-MLV 反转录酶),那么cDNA:RNA杂合链中的 RNA模板会在第一链合成过程中被切割。经过基因工程改造的反转录酶通常具有更低的RNase H活性,以防 RNA模板过早降解。

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