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HIV逆转录酶活性试剂盒(RT-PCR法)
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详细内容
产品英文名称:HIV Reverse Transcriptase Assay Kit(RT-PCR)
产品分类:酶学测定
纯度/规格:50T
保存:-20℃,有效期1年。
【实验原理】
聚合酶链式反应PCR过程利用模板变性,引物退火和引物延伸的多个循环来扩增DNA序列。因为上一轮的扩增产物又作为下一轮扩增的模板,是一个指数增长的过程,使其成为检测核酸和克隆基因的一种非常灵敏的技术。
一般经过25-35轮循环就可使模板DNA扩增达106倍。逆转录RT-PCR把以RNA为模板的cDNA合成(即RNA的反转录)与cDNA的PCR结合在一起,提供了一种基因表达检测、定量和cDNA克隆的快速灵敏的方法。由于cDNA包括了编码蛋白的完整序列,而且不含内含子,只要略经改造便可直接用于基因工程表达和功能研究,因此RT-PCR成为目获得目的基因的一种重要手段。
先是在逆转录酶的作用下从RNA合成cDNA,即总RNA中的mRNA在体外被反向转录合成DNA拷贝,因拷贝DNA的核苷酸序列完全互补于模板mRNA,称之为互补DNA(cDNA);然后再利用DNA聚合酶,以cDNA**链为模板,以四种脱氧核苷三磷酸dNTP为材料,在引物的引导下复制出大量的cDNA或目的片段。

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