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公司新闻

高氏1号培养基制备的操作步骤

点击次数:653发布时间:2023/3/30 11:37:39

   高氏1号培养基制备的操作步骤

 
  1、称量和溶化 按配方先称取可溶性淀粉,放入小烧杯中,并用少量冷水将淀粉调成糊状,再加入少于所需水量的沸水中,继续加热,使可溶性淀粉完全溶化。然后再称取其他各成分,并依次溶化,对微量成分FeSO4 .7 H2 O可先配成高浓度的贮备 液,按比例换算后再加入。待所有试剂完全溶解后,补充水分到所需的总体积。 配制固体培养基时,将称好的琼脂放入已溶的试剂中,在加热融化,后补充所损失的水分。
 
  2、调pH 用试纸测培养基的原始PH,如果偏酸,用滴管向培养基中加入1mol/LNaOH,边滴边搅拌,并随时用pH试纸测其pH,直至pH达7.6。反之,用1mol/LHCI进行调节。
 
  3、分装和加塞 将配制的培养基分装入试管内,在试管口或锥形瓶口上塞上棉塞。
 
  4、包扎 加塞后,将全部试管用麻绳捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,其外再用一根麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
 
  5、 灭菌 将上述培养基以1210C,20min,0.103MPa高压蒸汽灭菌。
 
  6、搁置斜面 将灭菌的试管培养基冷却至500C左右,将试管口端搁在玻璃棒上。斜面的斜度要适当,使斜面的长度约为管长 1/3。
 
  7、无菌检查 将灭菌培养基放入37℃的培养箱中培养24~28h,以检查灭菌是否彻底。和改良的差别就在于有没有FeSO4· 7H2O 高氏常常配完后变成褐色也是由于Fe2+氧化为Fe3+的关系,所以常常有人用螯合的FeSO4,防止氧化。

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