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公司新闻
岑特生物分析：石蜡切片及染色过程
点击次数：2068发布时间：2018/8/7 15:48:11
石蜡切片及HE染色过程：
一、 石蜡切片
1. 取材: 刀片要求锋利而薄,组织厚度约2—3mm, 大小1.5×1.5×0.2～0.3cm为宜. 取材时间越快越好.
2. 固定: 组织取下后应立即放入10%福尔马林（相当于4%甲醛）固定.
注意:
（1）. 固定液量应为组织块体积的40倍.
（2） 固定时间固定时间与使用的固定液种类和组织块大小, 温度等有关. 一般为3—24h.
（3）固定温度大多可在室温固定, 在低温（4℃）时间应延长.
（4）固定容器应大些.
3. 漂洗: 流水冲洗2—10h.
4. 脱水: 从低浓度酒精到高浓度酒精.
70%（数分钟）→80%（60-120’）→90%（60-120’）→95%（60-120’）→95%（60-120’）→100%（60-120’）→100%（60-120’）.
5. 透明: 组织块脱水后必须经过一种既能与酒精混合又能溶解石蜡的溶剂, 而使石蜡进入组织块. 常用二甲苯, 一般浸泡30m即可.
6. 浸蜡: 组织经透明后在熔化的石蜡内浸渍的过程称浸蜡. 一般需经2—3次浸渍才能完成, 总时间为3—4h. 用于浸蜡的石蜡熔点为52—56℃.
7. 包埋: 先将熔化的石蜡倒入包埋框再用加热的镊子将组织块放入. 包埋面必须平整. 包埋后石蜡稍凝后可移入冷水或冰箱中加速凝固.
8. 切片: 修块→切片→展片→捞片→烤片.
二、 HE染色
1. 染色前切片处理
（1） 脱福尔马林色素.
（2） 脱汞盐结晶.
（3） 脱黑色素.
2. 染色步骤
二 甲苯脱蜡（10’）→ 无水乙醇洗去二甲苯（1’×2次）→95%酒精（1’）→90%酒精（1’）→85%酒精（1’）→自来水洗（2’）→苏木精染色（1—5’）→自来水洗 （1’）→1%盐酸酒精分化20s→自来水洗（1’）→稀氨水（1%）反蓝30s→自来水或蒸馏水洗（1’）→伊红染色（20s—5min）→自来水洗 （30s）→85%酒精脱水（20s）→90%酒精脱水（30s）→95%酒精（1’）→95%酒精（1’）→100%酒精（2’）→100%酒精 （2’）→二甲苯（2’）→中性树胶封片.
3. 染色结果: 细胞核呈兰色, 胞浆呈红色.
三、 盐酸酒精的配制
浓盐酸0.5—1ml + 75%酒精99ml.
此液用一段时间后需延长或更换液体, 新液体分化时间要短.
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