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人chemerin ELISA试剂盒操作步骤
点击次数： 57发布时间：2024/7/25 10:23:40
- 上 传 者： 上海岑特生物科技有限公司
- 上传时间： 2024/7/25 10:23:40
- 文件大小： 39KB
- 文件类型： docx
- 所属分类： 操作维修手册
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资料简介： 产品名称：人Chemerin(RARRES2)ELISA试剂盒 组分 规格 数量 预包被抗人Chemerin抗体的96孔板 96T 1板 重组人Chemerin标准品(冻干) 50ng/管 2管 生物素标记抗人Chemerin(100X) 130μl 1管 亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)(100X) 130μl 1管 样品稀释液 30ml 1瓶 抗体稀释液 12ml 1瓶 ABC稀释液 12ml 1瓶 TMB显色液 10ml 1瓶 TMB终止液 10ml 1瓶 洗涤缓冲液(25X) 20ml 1瓶 封板膜 4张 浓度(ng/ml) 0 0.78 1.56 3.12 6.25 12.5 25 50 OD值 0.008 0.349 0.577 0.854 1.079 1.315 1.459 1.639 操作步骤 以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
英文名称：Human Retinoic acid receptor responder protein 2 ELISA Kit
产品规格：96T
本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法，用于体外定量分析人血清、血浆、细胞裂解液或细胞培养上清中Chemerin的含量。预先包被的抗体和检测相抗体都是Chemerin多克隆抗体。检测抗体经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的Chemerin呈正相关。
Chemerin也称TIG2或RARRES2，分子量为18KD。Chemerin基因在体内可以表达出一种具有低活性的复合蛋白，即体prochemerin，经细胞外蛋白酶水解作用，prochemerin可以转变为具有高活性的chemerin蛋白。Chemerin主要表达在白色脂肪组织、肝、卵巢等组织中。
检测指标：Retinoic acid receptor responder protein 2；RARRES2；Chemerin；Tazarotene-induced gene 2 protein；TIG2
检测范围：780pg/ml～50ng/ml
特异性：系统与其他细胞因子无交叉反应
敏感性：＜5pg/ml
产品组成：
储存条件：2-8℃（频繁使用时），-20℃（长时间不用时）。
有效期：6个月(4℃)；12个月（-20℃）。
参考标准曲线数据：(取自某一批次质检数据，仅供参考，用户需要自己建立标准曲线)
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照随货说明书中图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
计算
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