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上海岑特生物科技有限公司 主营产品:ELISA试剂盒,质粒定制,各种动物血清,酶联免疫试剂盒,白介素试剂盒,标准品对照品,培养基,抗体,细胞株,微生物,染色液溶液,实验耗材

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人可溶性白细胞分化抗原28(sCD28)ELISA试剂盒操作步骤

点击次数: 47发布时间:2023/12/28 11:10:30

  • 上 传 者: 上海岑特生物科技有限公司
  • 上传时间: 2023/12/28 11:10:30
  • 文件大小: 15KB
  • 文件类型: docx
  • 所属分类: 应用方法
  • 下载次数: 0次
  • 查看次数: 47

资料简介:  产品名称:人可溶性白细胞分化抗原28(sCD28)ELISA试剂盒

英文名称:Human soluble cluster of differentiation 28 (sCD28) ELISA Kit
试剂盒保存:保质期六个月,保存环境2-8℃(频繁使用时);-20℃(较长时间不用时)。
性状:试剂盒(含试剂+酶联板+覆膜等)
规格:48T/96T,可以提供定量和定性
使用范围:仅供科研检测,不得用于临床.
 
实验原理:
本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被人可溶性白细胞分化抗原28多克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中人可溶性白细胞分化抗原28浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中人可溶性白细胞分化抗原28含量。
 
操作注意事项:
(1)试剂应按标签说明书储存,使用恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
(2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
(3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质使用。
(4)使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
(5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
(6)洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
 
名称96孔配置48孔配置备注
微孔酶标板8孔×12条8孔×6条无
标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无
样本稀释液6mL3mL无
检测抗体-HRP10mL5mL无
20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释
底物A6mL3mL无
底物B6mL3mL无
终止液6mL3mL无
封板膜2张2张无
说明书1份1份无
自封袋1个1个无
 
人可溶性白细胞分化抗原28(sCD28)ELISA试剂盒质量保证样本处理及要求:
1.  血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过一夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.  血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.  组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。*后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4.  细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
 
人可溶性白细胞分化抗原28(sCD28)ELISA试剂盒质量保证标本要求: 
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
 

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