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上海岑特生物科技有限公司 主营产品:ELISA试剂盒,质粒定制,各种动物血清,酶联免疫试剂盒,白介素试剂盒,标准品对照品,培养基,抗体,细胞株,微生物,染色液溶液,实验耗材

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资料下载

白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫微板法)说明书

点击次数: 62发布时间:2022/1/7 16:07:33

  • 上 传 者: 上海古朵生物科技有限公司
  • 上传时间: 2022/1/7 16:07:33
  • 文件大小: 15KB
  • 文件类型: docx
  • 所属分类: 应用方法
  • 下载次数: 9次
  • 查看次数: 62

资料简介:

产品名称:白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫微板法)
英文名称:BCIP/NBTAlkalinePhosphataseColorDevelopmentKit
分类:生化检测
规格:100T
用途:用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的蛋白含量测定,该法操作简单、方法特异,既可手工操作,又可采用自动分析仪检测。
注意事项:检测原理是在酸性环境下,白蛋白分子带正电荷,与带负电荷的溴甲酚紫(Bromocresolpurple,BCP)结合生成绿色复合物,在603nm处有吸收波,该复合物的吸光度与白蛋白浓度成正比,与同样处理的白蛋白标准比较,求得待测样品中白蛋白浓度。

简介:
总蛋白(Total?Protein,TP)由白蛋白和球蛋白组成,检测白蛋白的方法有双缩脲法、色氨酸法、染料结合法。检测白蛋白的染料结合法可采用溴甲酚绿或溴甲酚紫染料结合,上述染料对白蛋白具有高度的亲和力,通常监测染料与白蛋白结合的初速率,该速率与样品中白蛋白浓度成正比。白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫微板法)检测原理是在酸性环境下,白蛋白分子带正电荷,与带负电荷的溴甲酚紫(Bromocresol?purple,BCP)结合生成绿色复合物,在603nm处有吸收波,该复合物的吸光度与白蛋白浓度成正比,与同样处理的白蛋白标准比较,求得待测样品中白蛋白浓度。本试剂盒多用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的蛋白含量测定,该法操作简单、方法特异,既可手工操作,又可采用自动分析仪检测。本试剂盒仅用于科研域,不宜用于临床诊断或其他用途。

自备材料:
1.离心管、小试管
2.96孔板
3.酶标仪

操作步骤(仅供参考):

1.取白蛋白标准配制液或稀释液加入到白蛋白标准中,充分溶解后配制成40mg/ml的白蛋白标准溶液,配制后可立即使用,溶解后的白蛋白标准溶液应-20℃保存。亦可按自己试验要求继续进行稀释,如稀释至1mg/ml。特别提示:待测蛋白溶解于什么样的稀释液中,白蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。例如待测蛋白溶解于蔗糖中,亦取白蛋白标准溶解于蔗糖中。一般也可以用NaCl或PBS作为溶解白蛋白标准品的稀释液。

2.样本处理:血清、血浆样本直接取检测。对于组织样本,组织质量(g):生理盐水比例,加入生理盐水或PBS,冰浴下匀浆后,离心,取上清待检。

3.白蛋白加样操作,按下表依次加入试剂:
加入物(μL)                      空白孔    标准孔   待测孔
白蛋白标准配制液                    5        -        -
白蛋白标准溶液(40mg/ml)            -       5        -
待检样品(血清、血浆、组织匀浆液)    -       -        5
BCP试剂                            250      250     250

4.先在酶标仪处以空白管调零,逐管加入BCP试剂,并立即混匀。

5.放置(30±3)s,读取标准孔和各待测孔的吸光度。

6.当遇到脂血混浊,可设“样本空白孔":取待测样品加入白蛋白标准配制液,予以校正。

计算:
白蛋白(g/L)=(待测孔吸光度/标准孔吸光度)×白蛋白标准液浓度(g/L)

参考区间:健康成年人 36~46g/L

注意事项:
1.白蛋白标准粉末溶解于白蛋白标准配制液后,即获得白蛋白标准原液,该原液中含有防腐剂,不影响后续检测,该蛋白标准原液-20℃长期保存。
2.如果没有分光光度计,也可以使用酶标仪测定。使用酶标仪测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著增加。
3.本法线性范围是10~50g/L,在10~40g/L呈良好线性范围。
4.CV可达0.45%,回收率可达99.3%~102%,平均回收率达100.5%。
5.该法测定正常样本的批间变异系数为6.3%。

有效期:6个月有效。白蛋白标准配制成溶液后应-20℃冻存。

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