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GUS染色液(即用型)操作步骤
点击次数： 71发布时间：2021/10/27 14:30:56
- 上 传 者： 上海古朵生物科技有限公司
- 上传时间： 2021/10/27 14:30:56
- 文件大小： 13KB
- 文件类型： docx
- 所属分类： 操作维修手册
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资料简介： 产品名称：GUS染色液(即用型) 简介：GUS(β-Galactosidase)基因是存在于E.coli等一些细菌基因组内的编码β-葡萄糖苷酸酶的一种水解酶，该基因常作为融合标记用于植物转基因分析和调控研究中。GUS受体基因系统有表达E.coli GUS酶的稳定性和在植物内的低活性 GUS染色液(即用型)又称β-葡萄糖苷酶基因染色试剂盒(β-Galactosidase Reporter Gene Staining Kit)简称为GUS染色液，其染色原理是适宜的反应条件下β-葡萄糖苷酶(GUS)可将X-Gluc水解成蓝色物质，该物质不溶解于转基因的细胞核组织中的靛蓝物质，具有GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点，可用肉眼或显微镜观察到。GUS染色液可用于生物化学活性分析、免疫分析以及组织和细胞的组织化学染色，多用于转基因植物的GUS基因表达分析，该即用型试剂比常规GUS染色液操作简便。该试剂仅用于科研域，不适用于临床诊断或其他用途。 操作步骤(仅供参考)： 注意事项：
规格：50ml/100ml
分类：植物染色
储存条件：—20℃,避光,6个月
用途：用于转基因植物的GUS基因表达的简易检测。
注意事项：染色原理是适宜的反应条件下,β-葡萄糖苷酶(GUS)可将X-Gluc水解成蓝色物质,该物质不溶解于转基因的细胞核组织中的靛蓝物质,具有GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点,可用肉眼或显微镜观察到。
1、配制X-Gluc溶液(50x)：取1ml X-Gluc Solution完全加至1支X-Gluc中，充分溶解，即获得X-Gluc溶液(50x)。配制好的X-Gluc溶液(50x)-20℃保存，1个月有效。
2、配制X-Gluc染色液：该染色液好现用现配，短期贮存可以4℃保存3天。
3、取适量待染叶片等组织加入适量GUS染色液，使GUS染色液完全浸没组织。
4、37℃孵育，随着孵育时间的延长，蓝色渐渐出现，当表达量较高时，GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点。
5、用乙醇脱去样本的叶绿素，一般样本浸没于乙醇1～3h，至阴性对照呈白色。如有必要可重复该脱色步骤，以便彻底清除叶绿素。样本保存于乙醇中，可用肉眼或普通光学显微镜下观察，白色背景上的蓝色即为GUS表达位点。
1、 配制好的GUS染色液可以4℃避光保存3天。
2、 由于组织特异性等原因，蓝色颜色反应可能不完全一致，应注意摸索具体实验条件。拟南芥的根、花和叶片以及烟草幼苗根就可直接染色；烟草和马铃薯这些植物的茎和叶须在染色切成薄片（1-3mm）；当操作大的组织和样品时，可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞，建议采购常规GUS染色液。
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