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草酸铵结晶紫染色液操作步骤
点击次数: 53发布时间:2021/10/20 15:31:29
- 上 传 者: 上海古朵生物科技有限公司
- 上传时间: 2021/10/20 15:31:29
- 文件大小: 17KB
- 文件类型: docx
- 所属分类: 操作维修手册
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资料简介: 中文名称:草酸铵结晶紫染色液 简介: 使用方法 2. 结晶紫染色 注意事项
规格:100ml
储存条件:室温,避光,24个月
用途:改良的细菌革兰染色
注意事项:conn改良Weigert革兰染色液的一种
草酸铵结晶紫染色液也称为龙胆紫,甲基紫10B,是一种三苯甲烷类染料,常用于革兰氏染色来进行细菌分类,或者用于细胞或组织学染色。结晶紫染色液(Crystal Violet Staining Solution)是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成深紫色的染色液。草酸铵结晶紫染色液是革兰氏染色法中的一种成分,主要由草酸铵、结晶紫、乙醇等组成。革兰阳性菌染色中,细胞经草酸铵结晶紫染色后再经Gram碘液处理,形成不溶性复合物,该复合物不能通过细胞壁,不易被脱色,所以保持紫色。染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。结晶紫是一种碱性染料,可以和细胞核中的DNA结合,从而产生细胞核染色。
1. 样品处理
1)石蜡切片:二甲苯脱蜡5-10 min;换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10 min;100%乙醇5 min;90%乙醇
2 min;70%乙醇2 min;蒸馏水2 min。
2)冰冻切片:蒸馏水2 min。
2)组培细胞:用4%多聚甲醛固定10 min以上(可根据具体实验选择其他的固定剂)。蒸馏水洗涤2 min。
换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2 min。
1)待检样本经以上方法处理后,直接加入结晶紫染色液室温染色10 min(染色液需要覆盖住样本,具体的染色时间可根据需要的染色结果进行调整)。
2)倒去染色液,用蒸馏水充分洗涤直至没有染料被洗下来。
3)室温晾干(可能需要过夜)。
4)光学显微镜下观察并拍照。
1) 初次使用本品建议先取1-2个样品做预实验。
3) 结晶紫对人体有害,请注意适当防护。
4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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