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资料下载

着丝粒蛋白C1抗体实验步骤

点击次数: 73发布时间:2021/9/22 14:20:44

  • 上 传 者: 上海古朵生物科技有限公司
  • 上传时间: 2021/9/22 14:20:44
  • 文件大小: 18KB
  • 文件类型: docx
  • 所属分类: 操作维修手册
  • 下载次数: 5次
  • 查看次数: 73

资料简介:

中文名称:着丝粒蛋白C1抗体
英文名称:Anti-CENPC1
浓度:1mg/1ml
规 格:0.2ml/200μg
抗体来源:Rabbit
克隆类型:polyclonal
交叉反应:Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Horse, Rabbit
产品类型:一抗
研究域:染色质和核信号 细胞周期蛋白 表观遗传学
蛋白分子量:predicted molecular weight: 107kDa
性状:Lyophilized or Liquid
免 疫 原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human CENPC1
亚型:IgG
纯化方法:affinity purified by Protein A
储 存 液:Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用: WB=1:100-500:ELISA=1:500-1000:IP=1:20-100:IHC-P=1:100-500:IHC-F=1:100-500:ICC=1:100-500:IF=1:100-500(石蜡切片需做抗原修复)

抗体反应特点:
1.高度特异性,产品仅用于科研特异性是抗原抗体反应的主要特征,特定抗原决定簇只与特定抗体结合;
2.可逆性:抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡, 其反应式为:Ag+AbAg·Ab;
3.适当浓度和比例;
4.敏感性:在测定血清中某一物质的含量时,化学比色法的敏感度为mg/ml水平,酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml,免疫测定中凝胶扩散法的敏感度与酶反应法相仿。

抗体反应的因素:
1.电解质 :抗原抗体特异结合后,胶体粒便可发生脱水作用,此时易受电解质影响,如有适当浓度的电解质存在就会使它们失去部分负电荷而相互凝聚,于是出现明显的凝集或沉淀现象。
2.酸碱度:合适的pH为6-8。
3.温度:37℃通常是抗原体反应适温度。
含试剂:
1、一抗(应用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、无色试剂:内源性过氧化物酶阻断剂
3、试剂A:封闭用正常山羊血清工作液
4、试剂B:生物素标记二抗工作液:生物素标记羊抗兔IgG
5、试剂C:辣根酶标记链酶卵白素工作液
6、显色液D液 (棕色) 1ml
7、显色液E液(白色)20ml

实验步骤:
1、石蜡切片,常规脱蜡至水
2、蒸馏水冲洗,pbs 浸泡5 分钟(如需采用抗原修复,在此步骤后进行)。
3、3%双氧水去离子水(无色液体)孵育15-20 分钟,以消除内源性过氧物酶活性。
4、滴加试剂A(蓝色液体)室温孵育15-20 分钟,倾去,勿洗。
5、滴加适当比例稀释的一抗,37℃孵育2-3 小时或4℃过夜。
6、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
7、滴加试剂B(黄色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。
8、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
9、滴加试剂C(橙色液体),室温或37℃孵育15-20 分钟。
10、PBS 冲洗,3 分钟3 次。
11、显色剂显色(DAB 或AEC)
12、自来水充分冲洗。
13、如果需要,可进行复染,脱水,透明。
14、选择适当的封片剂封片。

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