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甲苯胺蓝-DNA琼脂实验原理
点击次数： 125发布时间：2021/4/19 16:04:47
- 上 传 者： 上海古朵生物科技有限公司
- 上传时间： 2021/4/19 16:04:47
- 文件大小： 6KB
- 文件类型： jpg
- 所属分类： 应用方法
- 下载次数： 5次
- 查看次数： 125
资料简介： 产品名称：甲苯胺蓝-DNA琼脂
英文名称：Toluidine Blue-DNA Agar
规格:250g
有效期：三年
用途：甲苯胺蓝-DNA琼脂用于金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶的试验。
贮 存： 甲苯胺蓝-DNA琼脂于2～8℃避光贮存
原 理：
具有脱氧核糖核酸酶的细菌分解培养基中的脱氧核糖核酸(DNA)，使DNA长链水解成数个单核苷酸的寡核苷酸短链，使指示剂甲苯胺蓝作用变成粉红色;氯化钙提供阳离子作为激活剂;氯化钠维持均衡的渗透压;三羟甲基氨基甲烷为缓冲剂;琼脂为培养基的凝固剂。
配方(每升)：
脱氧核糖核酸(DNA) 0.3g
氯化钙 0.0011g
氯化钠 10g
甲苯胺蓝 0.083g
三羟甲基氨基甲烷 6.1g
琼脂 10g
蕞终pH 9.0±0.2
使用方法：
1. 称取 甲苯胺蓝-DNA琼脂26.5g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，115℃高压灭菌15min(即用可不需灭菌)，备用。
2. 载玻片的制备：取3mL甲苯胺蓝-DNA琼脂平铺于在载波片上制成标本，待琼脂凝固后，在琼脂上打成直径2mm的小洞(每个载玻片10-12个)，抽出小洞中的琼脂块。
3.从Baird-parker平板挑个可疑单菌落接种普通肉汤培养基中，36±1℃培养20h～24h后，经过100℃沸水煮15min,取0.01mL接种所制备的载玻片上小洞，于35℃培养4h后，观察结果。
质量控制：
质控菌株接种后，于35℃培养4h结果如下：按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养24±2小时。
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