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乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒说明书
点击次数： 64发布时间：2021/4/6 16:27:00
- 上 传 者： 上海古朵生物科技有限公司
- 上传时间： 2021/4/6 16:27:00
- 文件大小： 12KB
- 文件类型： png
- 所属分类： 操作维修手册
- 下载次数： 8次
- 查看次数： 64
资料简介： 中文名称:乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒
英文名称:LDH Cytotoxicity Assay Kit
产品规格：100t/500t
用途：又称乳酸脱氢酶漏出率检测试剂盒或乳酸脱氢酶释放检测试剂盒，通过检测细胞培养液中LDH活性或漏出率可反应药物的细胞毒性
储存条件：-20℃，避光，12个月
乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(LDH Cytotoxicity Assay Kit)，也称乳酸脱氢酶检测试剂盒(LDH Assay Kit)或乳酸脱氢酶释放检测试剂盒(LDH Release Assay Kit)，是种基于diaphorase催化的INT显色反应，通过比色法检测细胞毒性时释放的乳酸脱氢酶活性或检测其它样品中的乳酸脱氢酶活性的试剂盒。
本试剂盒可以用于常规的乳酸脱氢酶活性的检测，更常用于以LDH释放为指标的细胞毒性检测。同时，基于细胞总乳酸脱氢酶活性的检测，本试剂盒也可以用于检测细胞增殖和细胞毒性检测。
细胞凋亡或坏死而造成的细胞膜结构的破坏会导致细胞浆内的酶释放到培养液里，其中包括酶活性较为稳定的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)。通过检测从质膜破裂的细胞中释放到培养液中的LDH的活性，就可以实现对细胞毒性的定量分析。LDH释放被看做细胞膜完整性的重要指标，并被广泛用于细胞毒性检测。LDH释放被认为是以使用放射性的51Cr标记细胞，随后通过51Cr释放进行细胞膜完整性检测的安全有效的替代方法。
本试剂盒的基本原理是，在乳酸脱氢酶的作用下，NAD+被还原生成NADH，NADH和INT(2-p-iodophenyl-3-nitrophenyl tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脱氢酶(diaphorase)催化反应生成NAD+和强生色物甲臜(formazan)，在490nm波长下产生吸收峰，从而可以通过比色来定量乳酸脱氢酶的活性。吸光度与乳酸脱氢酶活性成线性正相关。该酶联反应原理的示意图如下：
可检测细胞培养液、细胞裂解液等样品中乳酸脱氢酶的活性。个试剂盒可进行500次检测。
保存条件：-20℃保存，年有效。需注意避免反复冻融。需避光保存。试剂盒解冻后可以短期4℃存放，2-3天内有效。
注意事项：
冷冻会使样品中部分乳酸脱氢酶失活，4℃可放置2-3天。建议样品准备好后尽量当天完成测定。
如果检测细胞培养液中的乳酸脱氢酶，由于血清含有乳酸脱氢酶，建议血清的使用浓度不要超过1%，并蕞好使用热灭活血清。如果定需要使用10%血清，在检测时定要设置没有细胞，但加入了相同体积培养液的对照孔，以用于消除背景。
细胞过度生长、密度过高、离心速度过大、培养箱内外温差过大，都会造成细胞释放乳酸脱氢酶增加。
如果希望进行乳酸脱氢酶活性的绝对定量，用户需自备乳酸脱氢酶标准品。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴次性手套操作。
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