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肠道菌增菌肉汤(EE) 实验步骤
点击次数： 70发布时间：2020/11/2 11:54:50
- 上 传 者： 上海古朵生物科技有限公司
- 上传时间： 2020/11/2 11:54:50
- 文件大小： 13KB
- 文件类型： docx
- 所属分类： 应用方法
- 下载次数： 3次
- 查看次数： 70
资料简介： 产品名称：肠道菌增菌肉汤（EE 肉汤） 实验内容： 实验的步骤：
英文名称：Enterobacteria enrichment broth?(EE broth)
规格：250g/瓶
用途：用于肠杆菌科细菌的增菌培养。
用法：称取本品45克，加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶，每瓶100ml，100℃加热30分钟，迅速在流动的冷水中冷却，无需高压灭菌。
质量控制和典型特征：
本培养基配制好后为绿色液体，接种10-100个大肠杆菌于36±1℃培养18-24h，应生长良好。
保存方法：防潮、避光、阴凉处保存。
作用：细胞的分离、鉴定、计数。
贮存：培养基在30℃下放置一天，无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。
1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查
2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物
3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查
4.过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌
（一）准确称量试剂：根据不同的菌类和用途，选择适宜的培养基，培养基所需试剂必须纯净。
（二）校正pH值：将称量好的培养基各种成分放入容器内，标记划线，加热溶解，补充水分，测定酸碱度，常用pH6.8～8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
（三）过滤：将玻璃漏斗置铁架上，再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中，将上述培养基倒入其中过滤至透明。
（四）分装：将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内（试管内每支装5mL；三角瓶中装100～150ml），塞好棉塞用牛皮纸包扎好，准备灭菌。
（五）灭菌：培养基的灭菌，常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性，须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理，即压力越大，蒸汽温度就越高。因此，在同一温度条件下，采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下，菌体吸收水分后，其蛋白质易于凝固变性，因为蒸汽的穿透力强，杀菌效果好。
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