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RNase Inhibitor(RNase 抑制剂)使用说明
点击次数： 397发布时间：2020/6/23 13:37:38
- 上 传 者： 上海古朵生物科技有限公司
- 上传时间： 2020/6/23 13:37:38
- 文件大小： 47KB
- 文件类型： docx
- 所属分类： 应用方法
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资料简介： 货号：C6101 规格：5000U 产品组成及保存条件： 编号 规格 储存条件 C6101 5000U -20°C，保质期24个月 浓度：40000U/ ml 产品简介： RNase Inhibitor可与RNase 非共价结合，开成1:1的复合物，可以特异性抑制RNase A、RNase B、RNase C和人胎盘RNase，不抑制T1和RNase H活性，具有广谱的RNase抑制活性。对RNase1、RNaseT1、S1核酸酶，RNase H或来源于曲霉属的RNase无抑制作用。兼容性好；不影响M-MLV或AMV Reverse Transciptase、Taq DNA Polymerase、T3、T7或SP6 RNA Polymerase 活性，在较宽的pH范围内（pH 5-8)均可发挥作用。尿素及巯基类试剂可以解离本品与RNase 形成的复合物，使RNase复活而RNase Inhibitor 不可逆失活，因此反应体系中应避免尿素及巯基类试剂存在。 RNase抑制剂的分子量为50kDa,通过非共价键以1:1的比例与RNase结合而抑制其酶活，结果常数大于1014 产品应用： 1、RT-PCR； 2、cDNA 合成反应，提高多聚核糖体的产量和活性； 3、体外无细胞系统转录或翻译（Cell-free in vitro transcription or translation system) 4、酶催化的RNA标记反应； 5、对RNA的完整性要求高的其他应用。 产品来源： 来自猪的RNase抑制基因在大肠杆菌中表达和多步纯化精制而成。 活性定义： 一个活性单位（U）定义为：抑制5ng RNase A 的50%活性所需的RNase Inhibitor量。 活性测定是通过抑制RNaseA对胞嘧啶 2´,3´ -环单磷酸盐的水解来测定的。 酶储存液： 20mM HEPES-KOH，50mM KCI,8mM DTT,50%Glycerol, PH7.6@25℃ 保存条件： -20°C，有效期24个月。 使用说明： 使用RNase Inhibitor避免RNase污染方法：加入抑制剂，使反应终浓度达到1U/ul。再加入组分过程中，RNase抑制剂应在其他可能是RNase污染源的组分（如酶、微量质粒）之前加入。 注意事项： 1、RNase Inhibitor 是一种50kDa的蛋白质，在变性条件下会失活。 2、RNase Inhibitor 应在低于50℃的温度下使用。 3、本品抑制RNase活性的pH值范围较广，在pH7~8时表现最大活性。 4、避免起泡剧烈搅拌、涡旋等操作，以防止本品失活。 附：RNA酶抑制剂各个实验反应量推荐： 1.RT PCR：推荐反应体系按照1U／ul； 2.cDNA合成：推荐反应体系按照0.5~1U／ul； 3.体外无细胞系统转录：推荐反应体系按照15~20U／ul； 4.SP6或T7RNA聚合酶的体外转录：推荐反应体系按照1U／ul； 5.多核糖体分离：推荐反应体系按照1U／ul； 6.体外翻译：推荐反应体系按照1U／ul； 7.酶催化的RNA标记反应：推荐反应体系按照1U／ul； 上述所述实验给出的是推荐反应用量，具体的RNA酶抑制剂在各个实验反应中的最佳用量需要具体实验具体分析，因为RNA酶抑制剂的具体定量与不同实验反应中的RNase含量和反应Buffer都有关联，所以，实验反应中的最佳NRA酶抑制剂的用量建议还是要做一下预实验来确定。
抑制剂,
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