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无酶细胞消化液使用说明书
点击次数： 80发布时间：2020/5/14 15:44:53
- 上 传 者： 上海古朵生物科技有限公司
- 上传时间： 2020/5/14 15:44:53
- 文件大小： 18KB
- 文件类型： docx
- 所属分类： 其它资料
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资料简介： 无酶细胞消化液不含蛋白消化酶，但能使贴壁细胞与培养瓶皿表面有效脱离达到分离细胞的目的。与常规胰蛋白酶消化方法相比，无酶细胞消化液作用温和，不损伤和破坏细胞，不影响细胞生物学特性，是肿瘤细胞在体移植实验的最佳细胞脱壁方法。细胞用无酶消化液脱壁后，可直接进行传代培养或离心收集用于其它实验。由于未使用蛋白酶制剂，因此特别适于收集细胞进行核蛋白和胞浆蛋白制备、Western Blot、免疫共沉淀实验，同时能避免样品蛋白降解，并避免蛋白酶制剂中的RNA酶对RNA的降解。 特点： <室温孵育10分钟，贴壁细胞即可从瓶皿脱落，温和而有效 <脱壁的细胞可用于连续传代 <培养肿瘤细胞进行在体移植实验的最佳消化方法 <避免蛋白酶过度消化细胞及降解样品蛋白 <制备胞核和胞浆蛋白、进行Western Blot、免疫共沉淀 <避免蛋白酶制剂中污染的RNA酶降解RNA 包装：100ml，200ml 储存：4oC密封储存2年。可重复高压灭菌。 使用方法： 1. 用PBS洗涤单层培养细胞，尽可能完全去除瓶中液体。 2. 加入适量无酶细胞消化液使其覆盖细胞表面，晃动瓶皿，使所有细胞均充分接触无酶消化液。 3. 室温放置10分钟或适宜时间，偶尔晃动瓶皿，直到细胞完全脱壁。可加入细胞培养基或2-3倍体积PBS缓冲液终止反应。脱壁后可能有成片细胞连在一起的现象，属于正常，如用作肿瘤移植，上述情况的产生可利于肿瘤细胞的生长。37oC时脱壁反应会加速。 4. 500 g 离心5-10分钟，弃上清，收集细胞。 5. 收集的细胞可用于：(1) 胞核胞浆蛋白制备；(2) Western blot；(3) 免疫沉淀实验；(4) DNA-蛋白结合实验；(5) RNA提取；(6) 分瓶传代。
细胞,
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