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植物核DNA大量提取试剂盒操作步骤
点击次数： 112发布时间：2020/4/20 11:49:47
- 上 传 者： 上海古朵生物科技有限公司
- 上传时间： 2020/4/20 11:49:47
- 文件大小： 14KB
- 文件类型： docx
- 所属分类： 操作维修手册
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资料简介： 产品说明: 改进的经典CTAB植物DNA抽提液内（添加多种针对植物特点的多糖、多酚去除成份）迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，lv仿抽提后通过离心清除多糖、多酚和蛋白，然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 进一步将多糖，多酚和细胞代谢物，蛋白等杂质去除， zui后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。 注意事项: ◆ 所有的离心步骤均在室温完成，使用离心力可以达到10，000×g的高速离心机。 ◆ 开始实验前将需要的水浴先预热到65℃备用。 ◆ 需要自备β-巯基乙醇。 ◆ Buffer P3 和HB buffer中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。 ◆ 不同来源的植物组织材料中提取的DNA 的量会有差异，一般1g新鲜组织典型产量可达30-250μg。 ◆ 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA, 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保PH大于7.5, PH过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA应该保存在-20℃。DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl， 1mM EDTA，PH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。 试剂盒特点: ◆ 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。 ◆ 不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。 ◆ 快速，简捷，单个样品操作一般可在1小时内完成。 ◆ 数种去多糖、多酚成份和多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达30Kb-50kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应。
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