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MC3T3-E1 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞操作说明
点击次数： 661发布时间：2018/10/11 16:53:21
- 上 传 者： 上海古朵生物科技有限公司
- 上传时间： 2018/10/11 16:53:21
- 文件大小： 7KB
- 文件类型： jpg
- 所属分类： 操作维修手册
- 下载次数： 229次
- 查看次数： 661
资料简介： 
收到常温细胞后如何处理？
首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与Procell技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。
用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。
仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬浮）细胞形态所用基础培养基血清比例所需细胞因子传代比例换液频率等。
静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照记录细胞生长状态。
贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。
悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作。
温馨提醒：
可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中，备用；细胞首次传代时，可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用，让细胞逐渐适应培养条件。
确认细胞状态良好后，应及时将部分细胞冻存，再进行后续的实验，避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失，影响后续实验。
建议客户收到细胞后前3天，100X200X400X各拍3张细胞照片，记录细胞状态，便于后续和Procell技术支持沟通交流。
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