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技术文章
DNA合成抑制剂的作用原理
点击次数：3117 发布时间：2022/6/29 13:54:57
DNA合成阻断法：选用DNA合成抑制剂，可逆地抑制DNA合成，而不影响其他时期细胞的运转，终可将细胞群阻断在S期或G1/S交界处。羟基脲、阿糖胞苷、氨甲蝶呤、高浓度AdR(脱氧腺苷)、GdR(脱氧鸟苷)和TdR，均可抑制DNA合成，使细胞同步化。
其中高浓度TdR对S期细胞的毒性较小，因此常用TdR双阻断法诱导细胞同步化：在细胞处于对数生长/期的培养基中加入过量TdR-（Hela细胞系，2mol/L；CHO细胞系，7.5mol/L），S期细胞被抑制，其他细胞继续运转，/后停在G1/S交界处，弃去TdR，洗涤细胞并加入新鲜培养液，细胞又开始分裂。当释放时间大于Ts时，所有细胞均脱离S期，再次加入过量TdR，细胞继续运转至G1/S交界处，被过量TdR抑制而停止。
该方法的优点是同步化程度高，适用于任何培养体系，可将儿乎所有的细胞同步化
缺点是产生非均衡生长现象，个别细胞体积增大。
DNA合成阻断法：选用DNA合成抑制剂，可逆地抑制DNA合成，而不影响其他时期细胞的运转，终可将细胞群阻断在S期或G1/S交界处。羟基脲、阿糖胞苷、氨甲蝶呤、高浓度AdR(脱氧腺苷)、GdR(脱氧鸟苷)和TdR，均可抑制DNA合成，使细胞同步化。
其中高浓度TdR对S期细胞的毒性较小，因此常用TdR双阻断法诱导细胞同步化：在细胞处于对数生长/期的培养基中加入过量TdR-（Hela细胞系，2mol/L；CHO细胞系，7.5mol/L），S期细胞被抑制，其他细胞继续运转，/后停在G1/S交界处，弃去TdR，洗涤细胞并加入新鲜培养液，细胞又开始分裂。当释放时间大于Ts时，所有细胞均脱离S期，再次加入过量TdR，细胞继续运转至G1/S交界处，被过量TdR抑制而停止。
该方法的优点是同步化程度高，适用于任何培养体系，可将儿乎所有的细胞同步化
缺点是产生非均衡生长现象，个别细胞体积增大。
原创作者：上海岑特生物科技有限公司
