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技术文章
ELISA试剂盒实验前如何做好优化?
点击次数：3422 发布时间：2019/3/25 10:38:20
ELISA检测试剂盒包被条件的优化：
1、包被液的挑选：通常常用的是pH9.6的碳酸盐缓冲液，假如包被的抗原在碱性条件下不稳定的话，也可以运用pH7.2的磷酸盐缓冲液。
2、包被浓度的挑选：包被的最适浓度随固相载体和包被物的性质改变，通常蛋白质的包被浓度为1-5ug/ml，要清晰对于特定包被抗原的最适包被浓度需求通过试验来断定。
3、包被温度的挑选：通常是4-8度条件下放置一个黑夜或者37度保温2小时，咱们强烈建议4-8度条件下包被，有利于蛋白活性的坚持。
4、包被抗原的挑选：可分为天然蛋白、重组蛋白和小分子抗原三大类。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有机化合物，因为分子量太小，通常难于直接吸附在酶标板上，通常都先使其与无关蛋白质，比如BSA等偶联，偶联物吸附于固相载体上。
ELISA检测试剂盒加样的优化：
在这一进程中，通常状况下有三次加样，它们分别是加标本，加酶联系物，加底物。冻结血清融解后，蛋白质部分浓缩，散布不均，应充沛混匀宜轻缓，避免气泡，可上下倒置混和，不要在混匀器上强烈振动。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清天然凝固、缩短后即可获得。也可在板孔中参加稀释液，再在其参加血清标本，然后在微型震动器上震动1分钟以保证混和。通常说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超越一星期测定的需低温冰存。
生物试剂的使用常识：
（1）试剂切忌与手接触（有些试剂有强腐蚀性、等特性）。
（2）要用洁净的药勺，量筒或滴管取用试剂，绝对不允许用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后，应将工具洗净（药勺要擦干）后，才可取用另一种试剂。
（3）试剂取用后一定要将瓶塞盖紧，不可放错瓶盖和滴管，绝不允许张冠李戴，用完后请及时将瓶放回原处，以免遗忘，带来不便。
（4）已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内（怕产生原试剂的再次污染）。
原创作者：上海岑特生物科技有限公司
