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技术文章
引物定量不准的原因
点击次数：3094 发布时间：2023/1/6 11:16:28
引物定量不准，出现这种情况的可能性有：
（1）定量错误、分装错误、引物抽干或收样过程中意外丢失。这种可能性有，但是很少，因为作为业的引物合成公司，生产人员都是经过严格的业培训，这种错误是要求谨慎避免甚至杜绝的。一般情况下，引物都有留样备份，接到用户投诉后，都会找出留样重新定量，一般都没有问题，如确实存在问题，则可安排重新准备一份。
（2）系统误差，我们认为10%左右为允许误差。使用过程中，引物工作浓度范围很宽，定量上的少许偏差不影响实验。
（3）用户收到引物干粉时，打开引物管盖没有离心或其他误操作导致引物干粉部分丢失。
（4）用户没有能够正确理解引物OD数的含义，没有能够正确使用分光光度计，特别是使用微量测定；用户没有将OD读数，正确地转换成母液中OD数。这种情况比较常见。
例如，验证标2OD引物量是否准确，简单的做法是：加入1ml水，彻底溶解混匀后，取100ul,加入900ul水，用光径为1cm的石英比色杯，波长260nm,此时光吸收的读数为0.2。
引物定量不准，出现这种情况的可能性有：
（1）定量错误、分装错误、引物抽干或收样过程中意外丢失。这种可能性有，但是很少，因为作为业的引物合成公司，生产人员都是经过严格的业培训，这种错误是要求谨慎避免甚至杜绝的。一般情况下，引物都有留样备份，接到用户投诉后，都会找出留样重新定量，一般都没有问题，如确实存在问题，则可安排重新准备一份。
（2）系统误差，我们认为10%左右为允许误差。使用过程中，引物工作浓度范围很宽，定量上的少许偏差不影响实验。
（3）用户收到引物干粉时，打开引物管盖没有离心或其他误操作导致引物干粉部分丢失。
（4）用户没有能够正确理解引物OD数的含义，没有能够正确使用分光光度计，特别是使用微量测定；用户没有将OD读数，正确地转换成母液中OD数。这种情况比较常见。
例如，验证标2OD引物量是否准确，简单的做法是：加入1ml水，彻底溶解混匀后，取100ul,加入900ul水，用光径为1cm的石英比色杯，波长260nm,此时光吸收的读数为0.2。
原创作者：上海岑特生物科技有限公司
