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技术文章
关于红细胞裂解液的使用说明
点击次数：3111 发布时间：2022/11/28 10:07:25
红细胞裂解液的作用原理
氯化铵是红细胞裂解液的主要效应物质，氨根离子不能通过细胞膜，而其他离子可以通过，造成细胞内外的离子浓度差异，形成了渗透压差，外部的水分会扩散至细胞内，使红细胞膨胀，达到裂解的效果。
一、组织细胞样品：
1.新鲜组织经胰酶或胶原酶等消化分散成单个细胞悬液，离心弃去上清液；
2.从4℃冰箱中取出ELS裂解液，按1:3-5的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液（1ml细胞压积加入3-5ml裂解液），轻轻吹打混匀；
3.800-1000rpm离心5-8分钟，离心弃去上层红色清液；
4.收集沉淀部分，加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次；
5.如裂解不完/全可重复步骤2和3；
6.重悬细胞，用于后续实验；如提取RNA，/好是于步骤4开始使用DEPC水配制的溶液中进行。
二、血细胞：
1.新鲜抗凝血，离心弃去上清液；
2.取出4℃冰箱预冷的ELS裂解液，按1:6-10的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液（1ml细胞压积加入6-10ml裂解液），轻轻吹打混匀；
3.800-1000rpm离心5-8分钟，离心弃去上层红色清液；
4.收集沉淀部分，加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次；
5.如裂解不完/全可重复步骤2和3；
6.重悬细胞，用于后续实验；如提取RNA，/好是于步骤4开始使用DEPC水配制的溶液进行。
原创作者：上海岑特生物科技有限公司
