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技术文章
如何分辨抗体是磷酸化还是非磷酸化
点击次数：3000 发布时间：2022/10/13 9:58:58
磷酸化和非磷酸化的抗体主要区别有：
1.磷酸化抗体的检测的是出于活性状态（磷酸化）的蛋白。
2.磷酸化抗体只针对磷酸化位点设计，是一种位点特异性的多抗，这到有些单抗的特性。3.普通抗体的合成（多抗）：原核表达蛋白-〉纯化-〉免疫动物-〉收获抗体。
4.磷酸化抗体合成：人工合成含磷酸化位点的多肽-〉人工体外磷酸化-〉链接半抗原-〉免疫动物-〉收获抗体。
5.磷酸化的蛋白很大部分是转录相关因子。因此使用磷酸化抗体和普通抗体。检测同一个蛋白，原位检测可能具有不同的细胞定位。转录因子磷酸化后由细胞质进入细胞核。
6.一般而言，磷酸化蛋白的实验结果与分子功能更直接相关。
非磷酸化抗体是测该蛋白的含量，不能知道其活性状态，磷酸化抗体是测该蛋白的磷酸化水平如何，侧重于了解该蛋白的一种活性状态。
磷酸化抗体主要是针对磷酸化位点制备的,检测该蛋白在细胞受到刺激时该蛋白的变化情况(磷酸化水平增强还是减弱)。
非磷酸化抗体(主要针对非磷酸化位点的肽段制备的)主要检测组织或细胞中该蛋白的表达情况,组织分布或细胞中定位,同时可以作为磷酸化水平变化的内参等.。
磷酸化和非磷酸化的抗体主要区别有：
1.磷酸化抗体的检测的是出于活性状态（磷酸化）的蛋白。
2.磷酸化抗体只针对磷酸化位点设计，是一种位点特异性的多抗，这到有些单抗的特性。3.普通抗体的合成（多抗）：原核表达蛋白-〉纯化-〉免疫动物-〉收获抗体。
4.磷酸化抗体合成：人工合成含磷酸化位点的多肽-〉人工体外磷酸化-〉链接半抗原-〉免疫动物-〉收获抗体。
5.磷酸化的蛋白很大部分是转录相关因子。因此使用磷酸化抗体和普通抗体。检测同一个蛋白，原位检测可能具有不同的细胞定位。转录因子磷酸化后由细胞质进入细胞核。
6.一般而言，磷酸化蛋白的实验结果与分子功能更直接相关。
非磷酸化抗体是测该蛋白的含量，不能知道其活性状态，磷酸化抗体是测该蛋白的磷酸化水平如何，侧重于了解该蛋白的一种活性状态。
磷酸化抗体主要是针对磷酸化位点制备的,检测该蛋白在细胞受到刺激时该蛋白的变化情况(磷酸化水平增强还是减弱)。
非磷酸化抗体(主要针对非磷酸化位点的肽段制备的)主要检测组织或细胞中该蛋白的表达情况,组织分布或细胞中定位,同时可以作为磷酸化水平变化的内参等.。
原创作者：上海岑特生物科技有限公司
