马肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒
英文简称：Horse TNF-α ELISA Kit
品牌名称：仁捷生物
运输方式：快递（生物干冰或冰袋运输）2-3天
品牌：自主研发（进口原材料生产）/进口原装
产品价格：价格优惠，欢迎来电洽谈！
使用范围：仅供科研检测,不得用于临床.
马肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒提供代测服务
（1）、原装进口抗体——高效性、灵敏性、特异性
（2）、规范包被操作——吸附均匀、吸附性好、空白值低、空底透明度高
（3）、先进的优化方案——回收利用率高、可靠性强
（4）、适用范围——适用于体液、组织匀浆，细胞培养上清液、尿液等各种类型的样本。
（5）、可检测指标齐全——生长因子、炎症因子、脂肪因子、基质金属蛋白酶等等
马肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒检测原理：
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被马肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的马肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
马肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒性能特点1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
4. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
5. 有效期：6个月
6. 检测范围：来电索取详细说明书
elisa试剂盒样本处理方法：
一、液体样本
液体样本处理原则：所有的液体样本，用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），如果以后碰到其他的液体样本，也按这个方法，纳入汇总表。
1、血清：用无菌管收集，室温血液自然凝固10-20分钟，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2、血浆：应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3、尿液：用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
4、胸腹水：用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5、脑脊液：用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
6、唾液：用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
7、细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
8、牛奶：用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
9、蜂蜜：用无菌管收集，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
10、全血：用含有抗凝剂的无菌管收集，立即轻轻摇动，来回轻轻颠倒数次，使血液和抗凝剂混匀，以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则：称取1g的固体样本，用9g的合适缓冲液溶解，分泌蛋白可以直接离心取上清检测，细胞内的蛋白，要先收集细胞，再用合适方法破碎，离心取上清测试。
1、组织标本：切割标本后，称取1g组织，加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS，用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清。分装一份待检测，其余冷冻备用，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。对于植物组织，不好匀浆的话，就在液氮中充分研磨；
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白，而是存在于细胞内的蛋白，这个时候，要先收集细胞，洗涤干净，再破碎细胞，离心取上清。
（1）培养的细胞
A、动物细胞：用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液，使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融（如果反复冻融，破碎效果不好，就采用超声波破碎），以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
B、植物细胞：用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液，使细胞浓度达到100万/ml左右，置于冰盒上，用超声破碎仪，设置破碎2s，冷却30s的方式，充分破碎细胞，以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（2）组织的细胞
切割标本后，称取1g组织，加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS，用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），去除上清，再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤：称取1g土壤，加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS，用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清。分装一份待检测，其余冷冻备用，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。如果是测分泌蛋白，直接取上清检测，测试细胞内蛋白，要破碎细胞。
4、咽拭子：加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS，溶解咽拭子头部，摇匀，用镊子取出咽拭子并挤干液体，2-8℃条件离心20分钟左右（2000-3000转/分），仔细收集上清。分装一份待检测，其余冷冻备用，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。如果是测分泌蛋白，直接取上清检测，测试细胞内蛋白，要破碎细胞。
5. 植物标本的精采集及保存
1、 称取0.1g（误差±3%以内）新鲜植物组织样本，在液氮中充分研磨；
2、 加入1ml的提取液（80%甲醇）, 置于-20度过夜；
3、 于4度，8000rpm，离心1小时，取上清；
4、 上清液过C-18固相萃取柱。具体步骤是： 80%甲醇（1ml）平衡柱→上样→收集样品→移开样品后用100%甲醇（5ml）洗柱→100%乙mi（5ml）洗柱→100%甲醇（5ml）洗柱→循环。过柱后的样本真空干燥或氮气吹干，保存备用；
5、 上样前加入pH7.4 PBS缓冲液（1ml定容）。混匀后室温放置30分钟，然后4度离心（8000rpm，15分钟），取上清并暂时保存于4度待用。
6.植物标本中相关酶或蛋白的测定：（粗提取）
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨；
2、 加入样品体积9倍的提取液（pH 7.4 PBS缓冲液）,3、 请于4度，8000rpm，离心30分钟，取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
2、标本采集后尽快进行实验，若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法，无法涵盖各种样本，对于一些特殊样本，建议实验人员多参考已发表的文献，自行设计合理的样本处理方法。
ELISA试剂盒计算解析方法例如：
计算方法示例：绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式，所得的Y值即是我们的样本值。（如上图所示）
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