ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
人可溶性肿瘤坏死因子受体2(sTNF-R2)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
人可溶性肿瘤坏死因子受体2(sTNF-R2)ELISA试剂盒其他产品信息:
小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA试剂盒RJ17171仁捷48T/96T
豚鼠血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA试剂盒RJ18124仁捷48T/96T
兔血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒RJ21295仁捷48T/96T
人可溶性sCD146分子(sCD146)ELISA试剂盒RJ13155仁捷48T/96T
人CD28分子(CD28)ELISA试剂盒RJ11293仁捷48T/96T
植物壬二酸(Azelex)ELISA试剂盒RJ21850仁捷48T/96T
猪白介素2受体α(IL2Rα)ELISA试剂盒RJ18280仁捷48T/96T
大鼠细胞色素P450家族成员3A4(CYP3A4)ELISA试剂盒RJ16355仁捷48T/96T
人游离前列腺特异性抗原(fPSA)ELISA试剂盒RJ14726仁捷48T/96T
小鼠N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)ELISA试剂盒RJ16814仁捷48T/96T
鱼肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒RJ21655仁捷48T/96T
人钙联蛋白(calnexin)ELISA试剂盒RJ12387仁捷48T/96T
牛乳铁传递蛋白(LTF)ELISA试剂盒RJ19226仁捷48T/96T
人肿瘤坏死因子受体超家族成员5(TNFRSF5;CD40)ELISA试剂盒RJ14872仁捷48T/96T
人FilariaIgG4 ELISA试剂盒RJ11395仁捷48T/96T
兔纤维蛋白原α(FGα)ELISA试剂盒RJ21265仁捷48T/96T
人转铁蛋白(TRF)ELISA试剂盒RJ14927仁捷48T/96T
大鼠血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA试剂盒RJ16477仁捷48T/96T
大鼠泛素C末端水解酶L1(Uch-L1)ELISA试剂盒RJ15635仁捷48T/96T
猪黑素皮质素受体2(MC2R)ELISA试剂盒RJ18443仁捷48T/96T
人皮质素3(Cortxin3)ELISA试剂盒RJ13605仁捷48T/96T
小鼠载脂蛋白B48(apo-B48)ELISA试剂盒RJ17899仁捷48T/96T
大鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒RJ15522仁捷48T/96T
人神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒RJ13826仁捷48T/96T
犬肿瘤标志物(DR70)ELISA试剂盒RJ19917仁捷48T/96T
人糖磺基转移酶10(CHST10)ELISA试剂盒RJ14041仁捷48T/96T
牛粘蛋白1(MUC1)ELISA试剂盒RJ19386仁捷48T/96T
人肌酸激酶脑型同工酶(CK-BB)ELISA试剂盒RJ12695仁捷48T/96T
小鼠免疫球蛋白G1(IgG1)ELISA试剂盒RJ17435仁捷48T/96T
犬血管性血友病因子(vWF)ELISA试剂盒RJ19867仁捷48T/96T
人卵巢癌抗原(CA125)ELISA试剂盒RJ13380仁捷48T/96T
人血小板衍生生长因子β受体(PDGFRβ)ELISA试剂盒RJ14535仁捷48T/96T
大鼠透明质酸结合蛋白(HABP)ELISA试剂盒RJ16293仁捷48T/96T
大鼠白细胞介素33(IL-33)ELISA试剂盒RJ15473仁捷48T/96T
人抗小鼠抗体(HAMA)ELISA试剂盒RJ13075仁捷48T/96T
猪胆固醇7α羟化酶(CYP7A1)ELISA试剂盒RJ18359仁捷48T/96T
人生存素(survivin)ELISA试剂盒RJ13866仁捷48T/96T
犬谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)ELISA试剂盒RJ19691仁捷48T/96T
大鼠纤维蛋白原(FIB)ELISA试剂盒RJ16372仁捷48T/96T
猪羟甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-CoA)ELISA试剂盒RJ18595仁捷48T/96T
小鼠P物质受体(SP-R)ELISA试剂盒RJ16824仁捷48T/96T
人热休克蛋白70(HSP⁻⁷0)ELISA试剂盒RJ13735仁捷48T/96T
大鼠生长因子(GH)ELISA试剂盒RJ16220仁捷48T/96T
山羊补体因子B(CFB)ELISA试剂盒RJ20111仁捷48T/96T
大鼠肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)ELISA试剂盒RJ15643仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)