ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
微生物磷酸果糖激酶(PFK)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
微生物磷酸果糖激酶(PFK)ELISA试剂盒其他产品信息:
大鼠甘油三脂(TG)ELISA检测试剂盒RJ16705仁捷48T/96T
人肝脂酶(HL)ELISA试剂盒RJ12432仁捷48T/96T
鹅金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒RJ20734仁捷48T/96T
人神经节苷脂M3抗体(GM3-Ab)ELISA试剂盒RJ13822仁捷48T/96T
大鼠谷氨酸脱氢酶(GLDH)ELISA试剂盒RJ15701仁捷48T/96T
兔血纤蛋白原(Fbg)ELISA试剂盒RJ21296仁捷48T/96T
人蛋白精氨酸脱亚氨酶4(PADI4)ELISA试剂盒RJ12158仁捷48T/96T
大鼠肝脂肪酸结合蛋白(L-FABP)ELISA试剂盒RJ15674仁捷48T/96T
犬组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒RJ19932仁捷48T/96T
猴β干扰素(IFNβ)ELISA试剂盒RJ20769仁捷48T/96T
大鼠可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒RJ15935仁捷48T/96T
鱼游离胆固醇(FC)ELISA试剂盒RJ21718仁捷48T/96T
大鼠S100钙结合蛋白A11(S100A11)ELISA试剂盒RJ15300仁捷48T/96T
大鼠肉毒碱(Carnitine)ELISA试剂盒RJ16169仁捷48T/96T
兔白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒RJ20994仁捷48T/96T
小鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒RJ17050仁捷48T/96T
人丙氨酸转氨酶/谷丙转氨酶(ALT/GPT)ELISA试剂盒RJ11924仁捷48T/96T
牛白介素18(IL18)ELISA试剂盒RJ18931仁捷48T/96T
人总甲状腺激素(TT4)ELISA试剂盒RJ14945仁捷48T/96T
人连接蛋白-1(Hapln1)ELISA试剂盒RJ13279仁捷48T/96T
大鼠TNF-alpha ELISA试剂盒RJ15321仁捷48T/96T
豚鼠孕酮(PROG)ELISA试剂盒RJ18141仁捷48T/96T
马干扰素β(IFNβ)ELISA试剂盒RJ19470仁捷48T/96T
人二肽基肽酶4(DPP4/CD26)ELISA试剂盒RJ12292仁捷48T/96T
绵羊卵泡刺激素(FSH)ELISA试剂盒RJ20013仁捷48T/96T
人Ⅲ型胶原(ColⅢ)ELISA试剂盒RJ11195仁捷48T/96T
大鼠神经损伤诱导蛋白1(NINJ1)ELISA试剂盒RJ16192仁捷48T/96T
兔白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒RJ20976仁捷48T/96T
大鼠醛固酮(ALD)ELISA试剂盒RJ16151仁捷48T/96T
鸡醛糖还原酶(AR)ELISA试剂盒RJ20512仁捷48T/96T
大鼠CD25分子(CD25)ELISA试剂盒RJ15185仁捷48T/96T
大鼠乙酰肝素酶(HPA)ELISA试剂盒RJ16542仁捷48T/96T
人泡状过表达癌症促生存蛋白1(VOPP1/ECOP/GASP)ELISA试剂盒RJ13594仁捷48T/96T
小鼠促甲状腺素释放激素(TRH)ELISA试剂盒RJ17023仁捷48T/96T
猪细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒RJ18679仁捷48T/96T
小鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA试剂盒RJ17221仁捷48T/96T
人双糖链蛋白聚糖(biglycan)ELISA试剂盒RJ13929仁捷48T/96T
人嗜伊红颗粒主要碱性蛋白(EMBP/MBP)ELISA试剂盒RJ13913仁捷48T/96T
人酸性磷酸酶(ACP)ELISA试剂盒RJ13977仁捷48T/96T
人β4整合素(ITGβ4/CD104)ELISA试剂盒RJ11678仁捷48T/96T
大鼠戊糖素(Pentosidine)ELISA试剂盒RJ16342仁捷48T/96T
人凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA试剂盒RJ12225仁捷48T/96T
小鼠巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA试剂盒RJ17294仁捷48T/96T
大鼠抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒RJ15917仁捷48T/96T
小鼠精氨酸酶1(Arg-1)ELISA试剂盒RJ17289仁捷48T/96T
大鼠内皮抑素(ES)ELISA试剂盒RJ16062仁捷48T/96T
山羊苹果酸脱氢酶(MDH)ELISA试剂盒RJ20167仁捷48T/96T
大鼠甘氨酸(Gly)ELISA试剂盒RJ15663仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)