ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
犬胰岛素自身抗体(IAA)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
犬胰岛素自身抗体(IAA)ELISA试剂盒其他产品信息:
鸡层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒RJ20347仁捷48T/96T
人卵白蛋白(Egg albumin)ELISA试剂盒RJ13379仁捷48T/96T
兔维甲酸受体应答蛋白2(RARRES2)ELISA试剂盒RJ21250仁捷48T/96T
食蟹猴胰高血糖素(GC)ELISA试剂盒RJ20898仁捷48T/96T
人核因子κB(NF-κB)ELISA试剂盒RJ12603仁捷48T/96T
人儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒RJ12278仁捷48T/96T
豚鼠黏蛋白(Mucin)ELISA试剂盒RJ18098仁捷48T/96T
牛前动力蛋白受体1(PKR1)ELISA试剂盒RJ19202仁捷48T/96T
人β转导素重复序列包含蛋白(BTRC)ELISA试剂盒RJ11720仁捷48T/96T
人再生胰岛衍生1α/胰石蛋白/胰线蛋白(REG1A)ELISA试剂盒RJ14765仁捷48T/96T
人血管生成抑制因子(Arresten)ELISA试剂盒RJ14448仁捷48T/96T
犬基质金属蛋白酶13(MMP-13)ELISA试剂盒RJ19720仁捷48T/96T
大鼠一氧化氮合酶(NOS)ELISA试剂盒RJ16698仁捷48T/96T
人Rho关联含卷曲螺旋蛋白激酶5(Rock-5)ELISA试剂盒RJ11526仁捷48T/96T
人免疫球蛋白A1(IgA1)ELISA试剂盒RJ13424仁捷48T/96T
人水通道蛋白4抗体(AQP4-Ab)ELISA试剂盒RJ13942仁捷48T/96T
小鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒RJ17433仁捷48T/96T
人磷脂酰甘油(PG)ELISA试剂盒RJ13336仁捷48T/96T
兔子载脂蛋白B48(apoB48)ELISA试剂盒RJ21449仁捷48T/96T
小鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒RJ17503仁捷48T/96T
猪皮质固醇结合球蛋白(SERPINA6)ELISA试剂盒RJ18582仁捷48T/96T
小鼠4-羟基壬烯醛(4-HNE)ELISA试剂盒RJ16717仁捷48T/96T
人甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽酶-2(MASP-2)ELISA试剂盒RJ12404仁捷48T/96T
大鼠转化生长因子β(TGF-β)ELISA试剂盒RJ16641仁捷48T/96T
大鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒RJ15440仁捷48T/96T
人去甲肾上腺素(NE)ELISA试剂盒RJ13708仁捷48T/96T
大鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISA试剂盒RJ15723仁捷48T/96T
大鼠甲状腺素抗体(TAb)ELISA试剂盒RJ15842仁捷48T/96T
人再生基因蛋白IV(REG4)ELISA试剂盒RJ14764仁捷48T/96T
牛奶叶酸ELISA试剂盒RJ19172仁捷48T/96T
大鼠甘胆酸ELISA试剂盒RJ16692仁捷48T/96T
犬胃动素(MTL)ELISA试剂盒RJ19828仁捷48T/96T
鸡活化素AB(ACVAB)ELISA试剂盒RJ20428仁捷48T/96T
人糖链抗原50(CA50)ELISA试剂盒RJ14049仁捷48T/96T
小鼠足细胞标记蛋白;足盂蛋白(PCX)ELISA试剂盒RJ17962仁捷48T/96T
人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA试剂盒RJ11255仁捷48T/96T
人膜攻击复合物(MAC)ELISA试剂盒RJ13467仁捷48T/96T
豚鼠胆囊收缩素A受体(CCKAR)ELISA试剂盒RJ18054仁捷48T/96T
人心钠肽(ANP)ELISA试剂盒RJ14336仁捷48T/96T
大鼠糖化血红蛋白(GHb)ELISA试剂盒RJ16269仁捷48T/96T
小鼠丙氨酸转氨酶/谷丙转氨酶(ALT/GPT)ELISA试剂盒RJ16982仁捷48T/96T
大鼠促甲状腺素释放激素(TRH)ELISA试剂盒RJ15543仁捷48T/96T
人白细胞分化抗原14(CDl4)ELISA试剂盒RJ11800仁捷48T/96T
大鼠肾病蛋白(Nephrin)ELISA试剂盒RJ16204仁捷48T/96T
人核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA试剂盒RJ12593仁捷48T/96T
山羊促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒RJ20120仁捷48T/96T
兔低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)ELISA试剂盒RJ21040仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)