ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒其他产品信息:
大鼠表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒RJ15499仁捷48T/96T
人磷酸化表皮生长因子受体(p-EGFR)ELISA试剂盒RJ13305仁捷48T/96T
鱼尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UDPGT)ELISA试剂盒RJ21628仁捷48T/96T
人CD147分子(CD147)ELISA试剂盒RJ11285仁捷48T/96T
鸡17羟皮质固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒RJ20249仁捷48T/96T
人补体因子B(CFB)ELISA试剂盒RJ11976仁捷48T/96T
人卵清蛋白特异性IgE(OVA-sIgE)ELISA试剂盒RJ13388仁捷48T/96T
大鼠谷氨酸脱羧酶65(GAD65)ELISA试剂盒RJ15702仁捷48T/96T
鱼脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)ELISA试剂盒RJ21723仁捷48T/96T
鸡补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒RJ20344仁捷48T/96T
大鼠抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)ELISA试剂盒RJ15919仁捷48T/96T
人制瘤素M受体(OSMR)ELISA试剂盒RJ14834仁捷48T/96T
植物总氨基酸(T-AA)ELISA试剂盒RJ21925仁捷48T/96T
猪胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)ELISA试剂盒RJ18751仁捷48T/96T
植物抗坏血酸过氧化物酶(APX)ELISA试剂盒RJ21817仁捷48T/96T
人胎盘亮氨酸氨肽酶(P-LAP)ELISA试剂盒RJ14012仁捷48T/96T
牛上皮性钙黏附蛋白(CDHE)ELISA试剂盒RJ19236仁捷48T/96T
猪基质金属蛋白酶23B(MMP23B)ELISA试剂盒RJ18465仁捷48T/96T
兔血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒RJ21288仁捷48T/96T
小鼠磷酸甘油酸激酶(PGK)ELISA试剂盒RJ17396仁捷48T/96T
鹅激活素A(ACV-A)ELISA试剂盒RJ20733仁捷48T/96T
人真核翻译起始因子3a(eIF3a)ELISA试剂盒RJ14788仁捷48T/96T
人血清淀粉样蛋白A4(SAA4)ELISA试剂盒RJ14487仁捷48T/96T
小鼠磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA试剂盒RJ17414仁捷48T/96T
人抗肝细胞膜抗体(LMA)ELISA试剂盒RJ12964仁捷48T/96T
山羊阿黑皮素原(POMC)ELISA试剂盒RJ20083仁捷48T/96T
人端粒重复序列结合因子1(TERF1)ELISA试剂盒RJ12248仁捷48T/96T
猪早老素2(PS2)ELISA试剂盒RJ18793仁捷48T/96T
人大疱性天疱疮抗体(BP)ELISA试剂盒RJ12103仁捷48T/96T
人促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)ELISA试剂盒RJ12079仁捷48T/96T
人抗流行性出血热病毒抗体IgM(EHF)ELISA试剂盒RJ13022仁捷48T/96T
鸭生长激素1(GH1)ELISA试剂盒RJ20692仁捷48T/96T
小鼠白细胞介素9(IL-9)ELISA试剂盒RJ16961仁捷48T/96T
仓鼠肿瘤坏死因子α(TNFα)ELISA试剂盒RJ18182仁捷48T/96T
人腺苷A2a受体(ADORA2a)ELISA试剂盒RJ14308仁捷48T/96T
人难辨梭状芽孢杆菌毒素B(TOXB)ELISA试剂盒RJ13487仁捷48T/96T
鸡基质金属蛋白酶2(MMP2)ELISA试剂盒RJ20439仁捷48T/96T
小鼠直接胆红素(DBIL)ELISA试剂盒RJ17921仁捷48T/96T
昆虫胰蛋白酶(trypsin)ELISA试剂盒RJ21979仁捷48T/96T
犬前白蛋白(PA)ELISA试剂盒RJ19779仁捷48T/96T
小鼠α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)ELISA试剂盒RJ16865仁捷48T/96T
犬α1微球蛋白(α1MG)ELISA试剂盒RJ19584仁捷48T/96T
大鼠可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒RJ15933仁捷48T/96T
小鼠β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒RJ16889仁捷48T/96T
犬表达于SiSo细胞系的受体结合型肿瘤抗原(EBAG9)ELISA试剂盒RJ19626仁捷48T/96T
人嗜酸性粒细胞趋化蛋白(Eotaxin;CCL11)ELISA试剂盒RJ13910仁捷48T/96T
人神经细胞粘附分子1(NCAM-1;CD56)ELISA试剂盒RJ13844仁捷48T/96T
人早老素2(PS-2)ELISA试剂盒RJ14767仁捷48T/96T
人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒RJ14913仁捷48T/96T
人磷脂酰丝氨酸(PS)ELISA试剂盒RJ13341仁捷48T/96T
猪唾液皮质醇ELISA试剂盒RJ18659仁捷48T/96T
大鼠芳香族L-氨基酸脱羧酶(AADC)ELISA试剂盒RJ15636仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)