ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
人巨噬细胞活化因子(MAF)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
人巨噬细胞活化因子(MAF)ELISA试剂盒其他产品信息:
人抗核仁纤维蛋白抗体(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA试剂盒RJ12973仁捷48T/96T
豚鼠增殖细胞核抗原(PCNA)ELISA试剂盒RJ18142仁捷48T/96T
小鼠肺炎支原体抗体(MP-Ab)ELISA试剂盒RJ17099仁捷48T/96T
人骨成型蛋白6(BMP-6)ELISA试剂盒RJ12512仁捷48T/96T
大鼠β-神经生长因子(β-NGF)ELISA试剂盒RJ15382仁捷48T/96T
人铜蓝蛋白(CP/CER)ELISA试剂盒RJ14088仁捷48T/96T
人基质裂解蛋白(MAT)ELISA试剂盒RJ12732仁捷48T/96T
猴子神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒RJ20877仁捷48T/96T
鹅白细胞介素4(IL-4)ELISA试剂盒RJ20714仁捷48T/96T
绵羊乳糖酶(Lactase)ELISA试剂盒RJ20031仁捷48T/96T
犬血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒RJ19860仁捷48T/96T
小鼠β淀粉样蛋白1-42抗体(Aβ1-42Ab)ELISA试剂盒RJ16879仁捷48T/96T
猪P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)ELISA试剂盒RJ18244仁捷48T/96T
鱼7-乙氧基-3-异吩恶唑酮-脱乙基酶(EROD)ELISA试剂盒RJ21516仁捷48T/96T
猪磷酸激酶γ1(PHKG1)ELISA试剂盒RJ18528仁捷48T/96T
马补体因子B(CFB)ELISA试剂盒RJ19459仁捷48T/96T
鱼补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒RJ21547仁捷48T/96T
人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒RJ13273仁捷48T/96T
绵羊窖蛋白Caveolin1(CAV1)ELISA试剂盒RJ20006仁捷48T/96T
人破骨细胞分化因子(ODF)ELISA试剂盒RJ13614仁捷48T/96T
人组织因子(TF)ELISA试剂盒RJ15003仁捷48T/96T
人穿孔蛋白1(PRF1)ELISA试剂盒RJ12045仁捷48T/96T
猪5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒RJ18210仁捷48T/96T
鸡磷酸化氨基末端蛋白激酶(P-JNK)ELISA试剂盒RJ20468仁捷48T/96T
人血小板衍生生长因子受体(PDGFR)ELISA试剂盒RJ14536仁捷48T/96T
犬神经型一氧化氮合成酶(nNOS)ELISA试剂盒RJ19796仁捷48T/96T
人结缔组织活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA试剂盒RJ12837仁捷48T/96T
牛C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒RJ18874仁捷48T/96T
大鼠8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)ELISA试剂盒RJ15117仁捷48T/96T
小鼠腺甘酸激酶(ADK)ELISA试剂盒RJ17725仁捷48T/96T
人Ⅸ型胶原蛋白(Ⅸ-C)ELISA试剂盒RJ11208仁捷48T/96T
大鼠CD44分子(CD44)ELISA试剂盒RJ15194仁捷48T/96T
人抗糖蛋白抗体(GP)ELISA试剂盒RJ13059仁捷48T/96T
人白细胞介素6受体(IL-6R)ELISA试剂盒RJ11851仁捷48T/96T
人内皮细胞特异性分子(Endocan;ESM-1)ELISA试剂盒RJ13506仁捷48T/96T
人脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)ELISA试剂盒RJ14817仁捷48T/96T
猪骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒RJ18428仁捷48T/96T
大鼠Ⅲ型胶原(ColⅢ)ELISA试剂盒RJ15143仁捷48T/96T
人苹果酸脱氢酶1(MDH1)ELISA试剂盒RJ13612仁捷48T/96T
大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA试剂盒RJ15908仁捷48T/96T
人1,25-二羟基维生素D3(1,25(OH)2D3)ELISA试剂盒RJ15013仁捷48T/96T
大鼠P糖蛋白;渗透性糖蛋白(P-gp)ELISA试剂盒RJ15285仁捷48T/96T
人大疱性天疱疮抗体(BP)ELISA试剂盒RJ12103仁捷48T/96T
人组织相容性复合体Ⅰ相关基因A(MICA)ELISA试剂盒RJ14999仁捷48T/96T
人CD28分子(CD28)ELISA试剂盒RJ11293仁捷48T/96T
牛甜菜碱同型半胱氨酸S甲基转移酶1(BHMT)ELISA试剂盒RJ19270仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)