ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
人14-3-3蛋白eta(YWHAH)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
人14-3-3蛋白eta(YWHAH)ELISA试剂盒其他产品信息:
小鼠谷胱甘肽过氧化酶1(GSH-1)ELISA试剂盒RJ17991仁捷48T/96T
人垂体腺苷酸环化酶激活肽38(PACAP38)ELISA试剂盒RJ12052仁捷48T/96T
人HLA II组织相容性抗原DQalpha1(HLA-DQA1)ELISA试剂盒RJ11417仁捷48T/96T
人自然杀伤细胞(NK)ELISA试剂盒RJ14936仁捷48T/96T
人CD209分子(CD209)ELISA试剂盒RJ11290仁捷48T/96T
大鼠谷丙转氨酶ELISA试剂盒RJ16693仁捷48T/96T
兔叉头框蛋白P3(FOXP3)ELISA试剂盒RJ21015仁捷48T/96T
人MEK激酶()ELISA试剂盒RJ15037仁捷48T/96T
人周期素依赖性激酶2(CDK2)ELISA试剂盒RJ14898仁捷48T/96T
豚鼠白蛋白(ALB)ELISA试剂盒RJ18014仁捷48T/96T
猪诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA试剂盒RJ18776仁捷48T/96T
小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA试剂盒RJ16856仁捷48T/96T
兔子胶原酶II(CollagenaseII)ELISA试剂盒RJ21401仁捷48T/96T
人P27蛋白(P27)ELISA试剂盒RJ11497仁捷48T/96T
大鼠磷酸化Ras基因家族同源物A(P-RhoA)ELISA试剂盒RJ15991仁捷48T/96T
人氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒RJ14555仁捷48T/96T
小鼠犬尿氨酸-3-单加氧酶(KMO)ELISA试剂盒RJ17526仁捷48T/96T
小鼠丙氨酸转氨酶/谷丙转氨酶(ALT/GPT)ELISA试剂盒RJ16982仁捷48T/96T
小鼠磷酸二酯酶4(PDE4)ELISA试剂盒RJ17394仁捷48T/96T
人FAS配体(FasL)ELISA试剂盒RJ11393仁捷48T/96T
马白蛋白(Albumin)ELISA试剂盒RJ19441仁捷48T/96T
犬白细胞介素4(IL-4)ELISA试剂盒RJ19615仁捷48T/96T
兔脂质转运蛋白(CETP)ELISA试剂盒RJ21337仁捷48T/96T
猪组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)ELISA试剂盒RJ18840仁捷48T/96T
大鼠白细胞介素33(IL-33)ELISA试剂盒RJ15473仁捷48T/96T
人胆碱乙酰化酶(CHAc)ELISA试剂盒RJ12129仁捷48T/96T
小鼠白介素31(IL-31)ELISA试剂盒RJ17986仁捷48T/96T
大鼠血小板VASP;P2Y12()ELISA试剂盒RJ16474仁捷48T/96T
人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒RJ12009仁捷48T/96T
人黑色素瘤标记物(MART/Melan-A)ELISA试剂盒RJ12613仁捷48T/96T
大鼠花生四烯酸(AA)ELISA试剂盒RJ15765仁捷48T/96T
大鼠乙酰辅酶A乙酰基转移酶2(ACAT2)ELISA试剂盒RJ16541仁捷48T/96T
人丁型肝炎IgM(HDVIgM)ELISA试剂盒RJ12233仁捷48T/96T
小鼠CD30配体(CD30L)ELISA试剂盒RJ16760仁捷48T/96T
人可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒RJ13141仁捷48T/96T
人蛋白激酶B(PKB)ELISA试剂盒RJ12153仁捷48T/96T
大鼠糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA试剂盒RJ16273仁捷48T/96T
人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒RJ11170仁捷48T/96T
猪粘蛋白2(MUC2)ELISA试剂盒RJ18798仁捷48T/96T
人抗弓形体IgM抗体(anti-toxIgM)ELISA试剂盒RJ12967仁捷48T/96T
人DNA损伤诱导转录因子4样蛋白(DDIT4/RTP801)ELISA试剂盒RJ11357仁捷48T/96T
人核因子κB(NF-κB)ELISA试剂盒RJ12603仁捷48T/96T
人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基转移酶2家族肽B4(UGT2B4)ELISA试剂盒RJ12282仁捷48T/96T
大鼠半胱氨酸蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒RJ15489仁捷48T/96T
人麻疹病毒(MV)ELISA试剂盒RJ13400仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)