ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
人补体片断5b(C5b)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
人补体片断5b(C5b)ELISA试剂盒其他产品信息:
人血小板相关补体3(PAC3)ELISA试剂盒RJ14525仁捷48T/96T
猪粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA试剂盒RJ18796仁捷48T/96T
兔谷胱甘肽过氧化酶1(GPX1)ELISA试剂盒RJ21075仁捷48T/96T
猪巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒RJ18493仁捷48T/96T
大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒RJ16412仁捷48T/96T
牛乳脂球表皮生长因子8(MFGE8)ELISA试剂盒RJ19230仁捷48T/96T
牛白介素15(IL15)ELISA试剂盒RJ18928仁捷48T/96T
人前心钠肽(Pro-ANP)ELISA试剂盒RJ13663仁捷48T/96T
犬促黄体生成激素(LH)ELISA试剂盒RJ19645仁捷48T/96T
土壤3-羟脂酰-辅酶A脱氢酶ELISA试剂盒RJ22274仁捷48T/96T
人内毒素(ET)ELISA试剂盒RJ13497仁捷48T/96T
大鼠生长激素释放因子(GRF)ELISA试剂盒RJ16215仁捷48T/96T
人氧化型谷胱甘肽(GSSG)ELISA试剂盒RJ14558仁捷48T/96T
人组蛋白脱乙酰基酶6(HDAC6)ELISA试剂盒RJ14964仁捷48T/96T
山羊胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)ELISA试剂盒RJ20203仁捷48T/96T
人普通急性淋巴细胞白血病抗原(CALLA)ELISA试剂盒RJ13633仁捷48T/96T
大鼠尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UDPGT)ELISA试剂盒RJ16074仁捷48T/96T
马干扰素γ(IFNγ)ELISA试剂盒RJ19471仁捷48T/96T
人肉毒碱脂酰转移酶(CACT)ELISA试剂盒RJ13755仁捷48T/96T
大鼠谷氨酸(Glu)ELISA试剂盒RJ15698仁捷48T/96T
人抗血小板抗体IgG(PA-IgG)ELISA试剂盒RJ13084仁捷48T/96T
植物抗坏血酸过氧化物酶(APX)ELISA试剂盒RJ21817仁捷48T/96T
绵羊血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒RJ20048仁捷48T/96T
大鼠抗甲状腺球蛋白抗体(TGAB)ELISA试剂盒RJ15905仁捷48T/96T
人Klotho蛋白(Klotho)ELISA试剂盒RJ11452仁捷48T/96T
兔III型前胶原(PC III)ELISA试剂盒RJ20935仁捷48T/96T
兔血纤蛋白原(Fbg)ELISA试剂盒RJ21296仁捷48T/96T
人载脂蛋白A4(ApoA-Ⅳ)ELISA试剂盒RJ14752仁捷48T/96T
植物异戊烯基腺嘌呤(2-IP)ELISA试剂盒RJ21905仁捷48T/96T
人琥珀酰辅酶A合成酶(SCS)ELISA试剂盒RJ12642仁捷48T/96T
人白细胞分化抗原14(CDl4)ELISA试剂盒RJ11800仁捷48T/96T
小鼠脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA试剂盒RJ17667仁捷48T/96T
大鼠凝血因子IX(FIX)ELISA试剂盒RJ16107仁捷48T/96T
犬巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP1β)ELISA试剂盒RJ19741仁捷48T/96T
鸡反胰岛素样生长因子2(IGF2AS)ELISA试剂盒RJ20384仁捷48T/96T
小鼠胰蛋白酶(TPS)ELISA试剂盒RJ17382仁捷48T/96T
大鼠可溶性髓系细胞触发受体-2(sTREM-2)ELISA试剂盒RJ15950仁捷48T/96T
猪正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA试剂盒RJ18800仁捷48T/96T
山羊血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒RJ20193仁捷48T/96T
大鼠柠檬酸合酶(CS)ELISA试剂盒RJ16089仁捷48T/96T
小鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA试剂盒RJ17647仁捷48T/96T
人颗粒酶B(Gzms-B)ELISA试剂盒RJ13122仁捷48T/96T
大鼠凝聚素(CLU)ELISA试剂盒RJ16090仁捷48T/96T
豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒RJ18021仁捷48T/96T
人中性粒细胞防御素3(DEFA3)ELISA试剂盒RJ14845仁捷48T/96T
绵羊白细胞介素1受体拮抗剂(IL-1Ra)ELISA试剂盒RJ19966仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)