ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
犬软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
犬软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA试剂盒其他产品信息:
大鼠一磷酸腺苷(AMP)ELISA试剂盒RJ16506仁捷48T/96T
兔纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)ELISA试剂盒RJ21261仁捷48T/96T
猪血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2(Tie2)ELISA试剂盒RJ18717仁捷48T/96T
大鼠降钙素受体(CTR)ELISA试剂盒RJ15854仁捷48T/96T
人γ谷氨酰转移酶(GGT)ELISA试剂盒RJ11730仁捷48T/96T
小鼠低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)ELISA试剂盒RJ17061仁捷48T/96T
人干扰素调节因子8(IRF8)ELISA试剂盒RJ12441仁捷48T/96T
鸡白细胞介素2(IL-2)ELISA试剂盒RJ20322仁捷48T/96T
大鼠骨成型蛋白7(BMP⁻⁷)ELISA试剂盒RJ15715仁捷48T/96T
大鼠吡啶酚(PYD)ELISA试剂盒RJ15497仁捷48T/96T
大鼠血小板内皮细胞粘附分子1(PECAM1;CD31)ELISA试剂盒RJ16481仁捷48T/96T
人单核细胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA试剂盒RJ12119仁捷48T/96T
人精子蛋白17(Sp17)ELISA试剂盒RJ12877仁捷48T/96T
人衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)ELISA试剂盒RJ14567仁捷48T/96T
猪催产素(OT)ELISA试剂盒RJ18352仁捷48T/96T
猪食欲素受体(OXR)ELISA试剂盒RJ18632仁捷48T/96T
人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)ELISA试剂盒RJ14232仁捷48T/96T
绵羊白介素1(IL-1)ELISA试剂盒RJ19958仁捷48T/96T
小鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒RJ17566仁捷48T/96T
兔子窖蛋白Caveolin1(CAV1)ELISA试剂盒RJ21402仁捷48T/96T
猪凝血酶原(PT)ELISA试剂盒RJ18572仁捷48T/96T
人载脂蛋白E(Apo-E)ELISA试剂盒RJ14759仁捷48T/96T
小鼠细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒RJ17709仁捷48T/96T
人正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA试剂盒RJ14801仁捷48T/96T
兔低密度脂蛋白(LDL)ELISA试剂盒RJ21039仁捷48T/96T
犬丙二醛(MDA)ELISA试剂盒RJ19630仁捷48T/96T
鱼11酮睾酮(KT)ELISA试剂盒RJ21508仁捷48T/96T
山羊可的松(Cortisone)ELISA试剂盒RJ20154仁捷48T/96T
小鼠可溶性白细胞分化抗原40配体(sCD40L)ELISA试剂盒RJ17358仁捷48T/96T
大鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒RJ16674仁捷48T/96T
兔子骨胶原交联/Ⅰ型胶原C端肽(Cr/CTXⅠ)ELISA试剂盒RJ21391仁捷48T/96T
植物1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(RubisCO)ELISA试剂盒RJ21928仁捷48T/96T
牛高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒RJ19048仁捷48T/96T
人CD117分子(CD117)ELISA试剂盒RJ11281仁捷48T/96T
小鼠白细胞介素1(IL-1)ELISA试剂盒RJ16931仁捷48T/96T
鱼乙酰辅酶A羧化酶α(ACACA)ELISA试剂盒RJ21715仁捷48T/96T
兔游离血红蛋白(f-Hb)ELISA试剂盒RJ21322仁捷48T/96T
人端粒重复序列结合因子2(TERF2)ELISA试剂盒RJ12249仁捷48T/96T
大鼠固胆固醇转运蛋白NPC1L1(NPC1L1)ELISA试剂盒RJ15732仁捷48T/96T
牛奶β内酰胺酶(β-lactamase)ELISA试剂盒RJ19169仁捷48T/96T
猪β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(βTG)ELISA试剂盒RJ18268仁捷48T/96T
人Brevican(BCAN)ELISA试剂盒RJ11244仁捷48T/96T
犬中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒RJ19916仁捷48T/96T
小鼠钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)ELISA试剂盒RJ17824仁捷48T/96T
鸡转录因子AP1(AP1)ELISA试剂盒RJ20635仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)