ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
人Dickkopf3(DKK3)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
人Dickkopf3(DKK3)ELISA试剂盒其他产品信息:
猪α1微球蛋白(α1M)ELISA试剂盒RJ18254仁捷48T/96T
鱼6-磷酸葡萄糖脱氢酶(6PGD)ELISA试剂盒RJ21515仁捷48T/96T
大鼠CD40配体(CD40L)ELISA试剂盒RJ15193仁捷48T/96T
人呼吸道合胞病毒IgG抗体ELISA检测试剂盒(定性)RJ12635仁捷48T/96T
人不对称二甲基精氨酸(ADMA)ELISA试剂盒RJ11983仁捷48T/96T
人叶酸受体α(FOLR1)ELISA试剂盒RJ14561仁捷48T/96T
人血管内皮生长因子A(VEGF-A)ELISA试剂盒RJ14419仁捷48T/96T
人靶向核糖核酸酶(TR)ELISA试剂盒RJ11760仁捷48T/96T
大鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒RJ16188仁捷48T/96T
人泛素分解酶(DUB)ELISA试剂盒RJ12307仁捷48T/96T
猪内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒RJ18564仁捷48T/96T
人单纯疱疹1型病毒ELISA试剂盒RJ12108仁捷48T/96T
山羊促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒RJ20118仁捷48T/96T
大鼠甲状腺素抗体(TAb)ELISA试剂盒RJ15842仁捷48T/96T
大鼠糖化血红蛋白(GHb)ELISA试剂盒RJ16269仁捷48T/96T
人五聚素3(PTX3)ELISA试剂盒RJ14183仁捷48T/96T
人Syndecan3/(SDC3)ELISA试剂盒RJ11565仁捷48T/96T
鱼ATP酶(ATPase)ELISA试剂盒RJ21520仁捷48T/96T
豚鼠α2HS糖蛋白(αHSG)ELISA试剂盒RJ18009仁捷48T/96T
猪(HYD)ELISA试剂盒RJ18596仁捷48T/96T
大鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒RJ15257仁捷48T/96T
人8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(hOGG1)ELISA试剂盒RJ11169仁捷48T/96T
羊白介素7(IL7)ELISA试剂盒RJ20231仁捷48T/96T
牛甘油醛3磷酸脱氢酶(GAPDH)ELISA试剂盒RJ19036仁捷48T/96T
大鼠肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒RJ15783仁捷48T/96T
猪A型口蹄疫抗体ELISA检测试剂盒(定性)RJ18221仁捷48T/96T
鸡白介素9(IL-9)ELISA试剂盒RJ20307仁捷48T/96T
人ADP核糖基化因子4(ARF4)ELISA试剂盒RJ11210仁捷48T/96T
鱼酰基辅酶A氧化酶(ACO)ELISA试剂盒RJ21685仁捷48T/96T
小鼠表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒RJ16980仁捷48T/96T
小鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒RJ17602仁捷48T/96T
人纤调蛋白(fibromodulin)ELISA试剂盒RJ14269仁捷48T/96T
猴子神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒RJ20877仁捷48T/96T
小鼠pro-MMP-9(pro-MMP-9)ELISA试剂盒RJ16821仁捷48T/96T
豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA-sIgE)ELISA试剂盒RJ18086仁捷48T/96T
犬半胱氨酸蛋白酶3(Casp-3)ELISA试剂盒RJ19620仁捷48T/96T
人游离原卟啉(FEP)ELISA试剂盒RJ14731仁捷48T/96T
大鼠磷酸化α-氨基羟甲基恶唑丙酸(p-AMPA)ELISA试剂盒RJ15993仁捷48T/96T
人钙泵(Serca)ELISA试剂盒RJ12379仁捷48T/96T
兔子核因子κB(NFκB)ELISA试剂盒RJ21395仁捷48T/96T
猴肝炎病毒细胞的受体1/肾损伤分子1/KIM1(HAVCR1)ELISA试剂盒RJ20793仁捷48T/96T
兔血小板选择素(PSelectin)ELISA试剂盒RJ21299仁捷48T/96T
大鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)ELISA试剂盒RJ16229仁捷48T/96T
牛β乳球蛋白AELISA试剂盒RJ18917仁捷48T/96T
小鼠Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)ELISA试剂盒RJ16729仁捷48T/96T
人β黑色素细胞刺激素(βMSH)ELISA试剂盒RJ11696仁捷48T/96T
人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA试剂盒RJ12893仁捷48T/96T
猪肝脂酶(LIPC)ELISA试剂盒RJ18404仁捷48T/96T
人沙眼衣原体抗原(CT)ELISA试剂盒RJ13804仁捷48T/96T
人抗甲状腺微粒体抗体(ATMA/TMAB)ELISA试剂盒RJ12992仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)