ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
微生物一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
微生物一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒其他产品信息:
大鼠缺氧诱导因子-1a(HIF-1a)ELISA试剂盒RJ16154仁捷48T/96T
猪巨细胞集落刺激因子(GMCSF)ELISA试剂盒RJ18497仁捷48T/96T
小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)ELISA试剂盒RJ17323仁捷48T/96T
兔c-Jun氨基末端激酶(JNK)ELISA试剂盒RJ20928仁捷48T/96T
山羊脂联素(ADP)ELISA试剂盒RJ20214仁捷48T/96T
大鼠肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)ELISA试剂盒RJ16206仁捷48T/96T
人肺炎衣原体抗体IgA(CpnIgA)ELISA试剂盒RJ12337仁捷48T/96T
人网膜素1(Omentin-1)ELISA试剂盒RJ14125仁捷48T/96T
山羊孕酮(PROG)ELISA试剂盒RJ20210仁捷48T/96T
小鼠糖化蛋白(GSP)ELISA试剂盒RJ17634仁捷48T/96T
犬骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒RJ19693仁捷48T/96T
牛MYHCIIAELISA试剂盒RJ18882仁捷48T/96T
大鼠白蛋白启动子D位点结合蛋白(DBP)ELISA试剂盒RJ15414仁捷48T/96T
山羊促黄体激素(LH)ELISA试剂盒RJ20115仁捷48T/96T
兔黄体生成素(LH)ELISA试剂盒RJ21102仁捷48T/96T
犬5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒RJ19548仁捷48T/96T
鱼孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒RJ21719仁捷48T/96T
山羊超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒RJ20112仁捷48T/96T
猪泼尼松龙(Prednisolone)ELISA试剂盒RJ18585仁捷48T/96T
大鼠色氨酸羟化酶(TPH)ELISA试剂盒RJ16181仁捷48T/96T
人胎儿血红蛋白(HBF)ELISA试剂盒RJ14005仁捷48T/96T
小鼠神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒RJ17572仁捷48T/96T
猪核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA试剂盒RJ18441仁捷48T/96T
兔补体成分5a(C5a)ELISA试剂盒RJ21007仁捷48T/96T
兔抗内皮细胞抗体(AECA)ELISA试剂盒RJ21149仁捷48T/96T
人β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒RJ11703仁捷48T/96T
牛乳清蛋白(LA)ELISA试剂盒RJ19221仁捷48T/96T
犬环磷酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒RJ19707仁捷48T/96T
兔子β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒RJ21372仁捷48T/96T
小鼠繁殖与呼吸综合征病毒抗体(PRRSV-Ab)ELISA试剂盒RJ17090仁捷48T/96T
鱼维生素A(VA)ELISA试剂盒RJ21675仁捷48T/96T
人血管生成抑制因子(Arresten)ELISA试剂盒RJ14448仁捷48T/96T
小鼠IV型胶原酶(IV-C)ELISA试剂盒RJ16800仁捷48T/96T
人网膜素(omentin)ELISA试剂盒RJ14124仁捷48T/96T
人葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)ELISA试剂盒RJ13631仁捷48T/96T
人抗乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)ELISA试剂盒RJ13091仁捷48T/96T
小鼠羟烷基辅酶A脱氢酶β(HADHβ) ELISA试剂盒RJ17514仁捷48T/96T
人α烯醇化酶(α-enolase)ELISA试剂盒RJ11666仁捷48T/96T
大鼠脯氨酸肽酶(PLD)ELISA试剂盒RJ16118仁捷48T/96T
人肾素(Renin)ELISA试剂盒RJ13862仁捷48T/96T
小鼠S100钙结合蛋白A4(S100A4)ELISA试剂盒RJ16831仁捷48T/96T
大鼠神经肽Nesfatin-1ELISA试剂盒RJ16195仁捷48T/96T
小鼠羧甲基赖氨酸(CML)ELISA试剂盒RJ17627仁捷48T/96T
兔脑钠素;脑钠尿肽(BNP)ELISA试剂盒RJ21172仁捷48T/96T
人半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒RJ11877仁捷48T/96T
人胶原酶II(Collagenase II)ELISA试剂盒RJ12825仁捷48T/96T
兔总胆汁酸(TBA)ELISA试剂盒RJ21459仁捷48T/96T
植物乙酰辅酶A羧化酶(ACC)ELISA试剂盒RJ21901仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)