ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA试剂盒其他产品信息:
小鼠绒毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA试剂盒RJ17542仁捷48T/96T
人空泡毒素相关蛋白A(VacA)ELISA试剂盒RJ13221仁捷48T/96T
小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA试剂盒RJ17750仁捷48T/96T
小鼠胸腺素β4(Tβ4)ELISA试剂盒RJ17752仁捷48T/96T
兔IIA型前胶原N末端肽(PIIANP)ELISA试剂盒RJ20934仁捷48T/96T
小鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒RJ17340仁捷48T/96T
人受体酪氨酸激酶(RTKs)ELISA试剂盒RJ13918仁捷48T/96T
人黑色素瘤活性抑制蛋白(MIA)ELISA试剂盒RJ12615仁捷48T/96T
鱼17β羟固醇脱氢酶(17β-HSD)ELISA试剂盒RJ21510仁捷48T/96T
小鼠胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA试剂盒RJ16975仁捷48T/96T
大鼠α2HS糖蛋白(αHSG)ELISA试剂盒RJ15343仁捷48T/96T
大鼠主要组织相容性复合体Ⅰ(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA试剂盒RJ16637仁捷48T/96T
兔磷酸肌酸激酶(CPK)ELISA试剂盒RJ21163仁捷48T/96T
大鼠血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)ELISA试剂盒RJ16446仁捷48T/96T
猪1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)ELISA试剂盒RJ18846仁捷48T/96T
人降脂素(Adipsin)ELISA试剂盒RJ12821仁捷48T/96T
犬血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)ELISA试剂盒RJ19858仁捷48T/96T
人谷草转氨酶ELISA试剂盒RJ15048仁捷48T/96T
兔90kDa热休克蛋白β1(HSP90β1)ELISA试剂盒RJ20908仁捷48T/96T
猪酸性成纤维细胞生长因子(FGF1)ELISA试剂盒RJ18642仁捷48T/96T
大鼠I型胶原羧基端前肽(CICP)ELISA试剂盒RJ15245仁捷48T/96T
小鼠CD4分子(CD4)ELISA试剂盒RJ16763仁捷48T/96T
猪纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒RJ18687仁捷48T/96T
鸭细胞周期素D1(CCND1)ELISA试剂盒RJ20697仁捷48T/96T
人载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒RJ14750仁捷48T/96T
植物血凝素;凝集素(PHA)ELISA试剂盒RJ21887仁捷48T/96T
人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒RJ12898仁捷48T/96T
人s腺苷同型半胱氨酸(SAH)ELISA试剂盒RJ11568仁捷48T/96T
犬超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒RJ19639仁捷48T/96T
土壤碱性磷酸酶ELISA试剂盒RJ22278仁捷48T/96T
小鼠整合素α2β1(ITGα2β1)ELISA试剂盒RJ17903仁捷48T/96T
鸡肉毒碱(Carnitine)ELISA试剂盒RJ20523仁捷48T/96T
人促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒RJ12071仁捷48T/96T
人谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)ELISA试剂盒RJ15049仁捷48T/96T
鸡线粒体促凋亡蛋白(SMAC)ELISA试剂盒RJ20571仁捷48T/96T
小鼠T淋巴细胞亚群(CD3,CD4,CD8)ELISA试剂盒RJ16845仁捷48T/96T
鸡睫状神经营养因子(CNTF)ELISA试剂盒RJ20451仁捷48T/96T
大鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒RJ15208仁捷48T/96T
大鼠Ⅰ型胶原α1(COL1α1)ELISA试剂盒RJ15124仁捷48T/96T
大鼠Ⅱ型胶原(ColⅡ)ELISA试剂盒RJ15136仁捷48T/96T
猪补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒RJ18319仁捷48T/96T
人多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)ELISA试剂盒RJ12266仁捷48T/96T
犬皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒RJ19775仁捷48T/96T
人胰高血糖素样肽1(GLP-1)ELISA试剂盒RJ14611仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)