ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
犬基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP9/GelatinaseB)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
犬基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP9/GelatinaseB)ELISA试剂盒其他产品信息:
小鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒RJ17716仁捷48T/96T
鸡髓样分化因子88(MyD88)ELISA试剂盒RJ20549仁捷48T/96T
大鼠谷氨酸受体2(GluR2)ELISA试剂盒RJ15700仁捷48T/96T
兔凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒RJ21185仁捷48T/96T
人趋化因子受体3(CCR3)ELISA试剂盒RJ13706仁捷48T/96T
人NADH-细胞色素b5还原酶(b5R)ELISA试剂盒RJ11474仁捷48T/96T
小鼠胰淀粉酶(PAMY)ELISA试剂盒RJ17847仁捷48T/96T
人铁调素(Hepcidin)ELISA试剂盒RJ14079仁捷48T/96T
人八聚体结合转录因子4(OCT4)ELISA试剂盒RJ11757仁捷48T/96T
小鼠抗肌内膜抗体IgA(EMAIgA)ELISA试剂盒RJ17318仁捷48T/96T
鱼羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR)ELISA试剂盒RJ21639仁捷48T/96T
人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TGSF)ELISA试剂盒RJ14888仁捷48T/96T
人脱氧皮质酮(DOC)ELISA试剂盒RJ14113仁捷48T/96T
大鼠补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒RJ15511仁捷48T/96T
小鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒RJ17234仁捷48T/96T
植物谷氨酰胺合成酶(GS)ELISA试剂盒RJ21784仁捷48T/96T
牛上皮性钙黏附蛋白(CDHE)ELISA试剂盒RJ19236仁捷48T/96T
小鼠α半乳糖基抗体(Gal)ELISA试剂盒RJ16857仁捷48T/96T
大鼠髓鞘相关生长抑制因子(Nogo-A)ELISA试剂盒RJ16254仁捷48T/96T
大鼠软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA试剂盒RJ16176仁捷48T/96T
马日本脑炎抗体(JEV-Ab)ELISA试剂盒RJ19504仁捷48T/96T
猴子内毒素(ET)ELISA试剂盒RJ20872仁捷48T/96T
山羊胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒RJ20201仁捷48T/96T
猪白介素12B(IL12B)ELISA试剂盒RJ18275仁捷48T/96T
人乙酰CoA羧化酶1(ACC1)ELISA试剂盒RJ14631仁捷48T/96T
人表面膜免疫球蛋白A(mIgA)ELISA试剂盒RJ11912仁捷48T/96T
牛粘膜腹泻病病毒(BVDV)ELISA试剂盒RJ19387仁捷48T/96T
人B7同源体3(B7-H3)ELISA试剂盒RJ11239仁捷48T/96T
小鼠前列环素(PGI2)ELISA试剂盒RJ17500仁捷48T/96T
人HLA-DPB1()ELISA试剂盒RJ11419仁捷48T/96T
大鼠apelin 36(AP36)ELISA试剂盒RJ15159仁捷48T/96T
鸡β内酰胺酶(β-lactamase)ELISA试剂盒RJ20296仁捷48T/96T
牛甜菜碱同型半胱氨酸S甲基转移酶1(BHMT)ELISA试剂盒RJ19270仁捷48T/96T
人神经激肽B(NKB)ELISA试剂盒RJ13819仁捷48T/96T
鱼磷酸果糖激酶(PFK)ELISA试剂盒RJ21609仁捷48T/96T
牛雌二醇(E2)ELISA试剂盒RJ18983仁捷48T/96T
人层连蛋白(Laminin)ELISA试剂盒RJ11988仁捷48T/96T
小鼠神经丝蛋白(NF)ELISA试剂盒RJ17569仁捷48T/96T
山羊白介素1β(IL1β)ELISA试剂盒RJ20091仁捷48T/96T
小鼠磷酸化酪氨酸羟化酶(p-TH)ELISA试剂盒RJ17402仁捷48T/96T
小鼠白细胞介素7(IL⁻⁷)ELISA试剂盒RJ16960仁捷48T/96T
人蛋白(肽酰脯氨酰顺;反异构酶)()ELISA试剂盒RJ12140仁捷48T/96T
人甘丙肽/甘丙素(GAL)ELISA试剂盒RJ12401仁捷48T/96T
犬高迁移率族AT犬Hook蛋白1(HMGA1)ELISA试剂盒RJ19682仁捷48T/96T
人抗心磷脂抗体IgG(ACA-IgG)ELISA试剂盒RJ13078仁捷48T/96T
牛胆酸(Cholicacid)ELISA试剂盒RJ19001仁捷48T/96T
人锌指蛋白36(ZFP36)ELISA试剂盒RJ14340仁捷48T/96T
小鼠白细胞介素17(IL-17)ELISA试剂盒RJ16940仁捷48T/96T
马结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒RJ19486仁捷48T/96T
人可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒RJ13148仁捷48T/96T
小鼠视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒RJ17594仁捷48T/96T
人蛋白质二硫键异构酶(PDI)ELISA试剂盒RJ12176仁捷48T/96T
人可溶程序性死亡分子-1(sPD-1)ELISA试剂盒RJ13127仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)