ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
大鼠D-乳酸(D-LA)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
大鼠D-乳酸(D-LA)ELISA试剂盒其他产品信息:
猪免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒RJ18545仁捷48T/96T
兔子白介素13(IL13)ELISA试剂盒RJ21374仁捷48T/96T
人催产素(OT)ELISA试剂盒RJ12091仁捷48T/96T
山羊白细胞介素10(IL-10)ELISA试剂盒RJ20097仁捷48T/96T
犬瘟热病毒抗原ELISA检测试剂盒RJ19938仁捷48T/96T
小鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)ELISA试剂盒RJ17376仁捷48T/96T
鸡热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒RJ20515仁捷48T/96T
猪Ⅲ型胶原(ColⅢ)ELISA试剂盒RJ18215仁捷48T/96T
人核转录因子κBp65(NFκBp65)ELISA试剂盒RJ12611仁捷48T/96T
人吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)ELISA试剂盒RJ15030仁捷48T/96T
人c-fosELISA试剂盒RJ11316仁捷48T/96T
牛骨桥素(OPN)ELISA试剂盒RJ19061仁捷48T/96T
人碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)ELISA试剂盒RJ12813仁捷48T/96T
牛的牛血清白蛋白残留检测ELISA试剂盒RJ19006仁捷48T/96T
人肌球蛋白轻链(MLC)ELISA试剂盒RJ12688仁捷48T/96T
小鼠眼小畸形关联转录因子(MITF)ELISA试剂盒RJ17820仁捷48T/96T
大鼠半胱氨酸蛋白酶8(Casp-8)ELISA试剂盒RJ15488仁捷48T/96T
人热休克蛋白72(HSP⁻⁷2)ELISA试剂盒RJ13736仁捷48T/96T
人低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)ELISA试剂盒RJ12194仁捷48T/96T
人免疫球蛋白GFc片段(Fcγ)ELISA试剂盒RJ13440仁捷48T/96T
人α1β糖蛋白(α1βGP)ELISA试剂盒RJ11622仁捷48T/96T
人CD5分子样蛋白(CD5L)ELISA试剂盒RJ11306仁捷48T/96T
人溶酶体相关膜蛋白2(HLAMP-2)ELISA试剂盒RJ13750仁捷48T/96T
猪热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒RJ18602仁捷48T/96T
绵羊谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)ELISA试剂盒RJ19990仁捷48T/96T
人S-腺苷甲硫氨酸(SAM)ELISA试剂盒RJ11567仁捷48T/96T
猪糖胺聚糖(GAG)ELISA试剂盒RJ18649仁捷48T/96T
大鼠紧密连接蛋白1(ZO-1)ELISA试剂盒RJ15875仁捷48T/96T
牛细胞色素b245重链(CYBB)ELISA试剂盒RJ19299仁捷48T/96T
人谷胱甘肽合成酶(GSS)ELISA试剂盒RJ15050仁捷48T/96T
人3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA试剂盒RJ11145仁捷48T/96T
人血纤肽/纤维蛋白肽B(FPB)ELISA试剂盒RJ14506仁捷48T/96T
人组织蛋白酶A(CTSA)ELISA试剂盒RJ14970仁捷48T/96T
大鼠核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒RJ15756仁捷48T/96T
鸡抑制素B(INHB)ELISA试剂盒RJ20611仁捷48T/96T
大鼠前列腺特异性抗原(PSA)ELISA试剂盒RJ16138仁捷48T/96T
小鼠血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒RJ17810仁捷48T/96T
小鼠一氧化氮合成酶1(NOS1)ELISA试剂盒RJ17829仁捷48T/96T
鱼促性腺激素释放激素(GnRH)ELISA试剂盒RJ21561仁捷48T/96T
绵羊补体片段3b受体(C3bR)ELISA试剂盒RJ19972仁捷48T/96T
猪氧还原蛋白过氧化物酶2(PRDX2)ELISA试剂盒RJ18740仁捷48T/96T
大鼠血清淀粉样蛋白A3(SAA3)ELISA试剂盒RJ16462仁捷48T/96T
小鼠N2乙酰胆碱受体IgG(N2-AChR IgG)ELISA试剂盒RJ16809仁捷48T/96T
猪8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒RJ18211仁捷48T/96T
人含patatin样磷脂酶域3(PNPLA3/ADPN/C22orf20)ELISA试剂盒RJ12578仁捷48T/96T
鱼心肌肌钙蛋白T(TNT)ELISA试剂盒RJ21689仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)