ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
猪凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
猪凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒其他产品信息:
人STEAP家族成员1(Steap1)ELISA试剂盒RJ11562仁捷48T/96T
猪粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA试剂盒RJ18796仁捷48T/96T
人毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型M2抗体(M-AChRM2)ELISA试剂盒RJ12243仁捷48T/96T
绵羊白细胞介素4(IL-4)ELISA试剂盒RJ19968仁捷48T/96T
人Gremlin1蛋白(GREM1)ELISA试剂盒RJ11406仁捷48T/96T
人糖抗原199(CA199)ELISA试剂盒RJ14045仁捷48T/96T
兔纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒RJ21260仁捷48T/96T
人褪黑激素硫酸盐(Melatonin-Sulfate)ELISA试剂盒RJ14100仁捷48T/96T
犬泛素蛋白(Ub)ELISA试剂盒RJ19668仁捷48T/96T
大鼠组蛋白H2b(histon-H2b)ELISA试剂盒RJ16665仁捷48T/96T
小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒RJ16806仁捷48T/96T
山羊碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA试剂盒RJ20149仁捷48T/96T
小鼠乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA试剂盒RJ17550仁捷48T/96T
人中介素(IMD)ELISA试剂盒RJ14837仁捷48T/96T
大鼠多聚ADP核糖聚合酶-1(PARP-1)ELISA试剂盒RJ15621仁捷48T/96T
山羊胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP4)ELISA试剂盒RJ20205仁捷48T/96T
牛神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒RJ19239仁捷48T/96T
牛心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)ELISA试剂盒RJ19308仁捷48T/96T
人半胱氨酸蛋白酶8(Casp-8)ELISA试剂盒RJ11875仁捷48T/96T
人胃泌素17(GAS17)ELISA试剂盒RJ14170仁捷48T/96T
鸡溶菌酶(LYS)ELISA试剂盒RJ20521仁捷48T/96T
小鼠1,25-二羟维生素D(3)24-羟化酶(CYP24A1)ELISA试剂盒RJ17977仁捷48T/96T
山羊补体因子B(CFB)ELISA试剂盒RJ20111仁捷48T/96T
猪凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA试剂盒RJ18576仁捷48T/96T
小鼠膀胱肿瘤抗原(BTA)ELISA试剂盒RJ17484仁捷48T/96T
人核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κBp65)ELISA试剂盒RJ12607仁捷48T/96T
大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βDglucosidase)ELISA试剂盒RJ16678仁捷48T/96T
人腺病毒抗原ELISA检测试剂盒(定性)RJ14307仁捷48T/96T
猪前列腺素G/H合酶2(PTGS2)ELISA试剂盒RJ18594仁捷48T/96T
人锌-α2糖蛋白(ZAG)ELISA试剂盒RJ14339仁捷48T/96T
大鼠胃蛋白酶原A(PGA)ELISA试剂盒RJ16329仁捷48T/96T
绵羊黄嘌呤氧化酶(XOD)ELISA试剂盒RJ19995仁捷48T/96T
大鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA试剂盒RJ16100仁捷48T/96T
绵羊环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒RJ19993仁捷48T/96T
犬白介素12B(IL12B)ELISA试剂盒RJ19599仁捷48T/96T
大鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA试剂盒RJ15797仁捷48T/96T
人P27蛋白(P27)ELISA试剂盒RJ11497仁捷48T/96T
小鼠无翅型MMTV整合位点成员2(WNT2)ELISA试剂盒RJ17690仁捷48T/96T
人细胞外信号调节激酶(ERK1;2)ELISA试剂盒RJ14238仁捷48T/96T
犬血纤蛋白原(Fbg)ELISA试剂盒RJ19877仁捷48T/96T
牛尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)ELISA试剂盒RJ19186仁捷48T/96T
大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA试剂盒RJ15108仁捷48T/96T
小鼠前列腺素H2(PGH2)ELISA试剂盒RJ17507仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)