ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA试剂盒其他产品信息:
小鼠三磷酸腺苷(ATP)ELISA试剂盒RJ17558仁捷48T/96T
小鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)ELISA试剂盒RJ17095仁捷48T/96T
人弹性蛋白酶(Elastase)ELISA试剂盒RJ12138仁捷48T/96T
小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒RJ16970仁捷48T/96T
小鼠乙酰胆碱(ACH)ELISA试剂盒RJ17859仁捷48T/96T
小鼠可溶性白细胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒RJ17359仁捷48T/96T
鱼5羟色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)ELISA试剂盒RJ21514仁捷48T/96T
鸭肝炎抗体ELISA试剂盒RJ20676仁捷48T/96T
牛总蛋白S(TPS)ELISA试剂盒RJ19411仁捷48T/96T
人解整合素样金属蛋白酶19(ADAM19)ELISA试剂盒RJ12850仁捷48T/96T
人肥素(FTO)ELISA试剂盒RJ12323仁捷48T/96T
人皮肤反应因子/炎性因子(SRF/IF)ELISA试剂盒RJ13600仁捷48T/96T
小鼠Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒RJ16728仁捷48T/96T
小鼠调节活化蛋白(Rantes)ELISA试剂盒RJ17652仁捷48T/96T
小鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒RJ17832仁捷48T/96T
人透明质酸结合蛋白(HABP)ELISA试剂盒RJ14093仁捷48T/96T
人Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(KL-6)ELISA试剂盒RJ11186仁捷48T/96T
兔白细胞介素23(IL-23)ELISA试剂盒RJ20989仁捷48T/96T
人SalusinAlpha(Salusinα)ELISA试剂盒RJ11544仁捷48T/96T
犬B淋巴细胞趋化因子1(BLC1/CXCL13)ELISA试剂盒RJ19557仁捷48T/96T
人乙型肝炎病毒e抗体ELISA检测试剂盒(定性)RJ14643仁捷48T/96T
小鼠卵泡刺激素(FSH)ELISA试剂盒RJ17422仁捷48T/96T
植物査尔酮合酶(CHS)ELISA试剂盒RJ21763仁捷48T/96T
小鼠前列腺素F(PGF)ELISA试剂盒RJ17505仁捷48T/96T
人Toll样受体1(TLR1)ELISA试剂盒RJ11578仁捷48T/96T
大鼠11β羟基固醇脱氢酶1(11β-HSD1)ELISA试剂盒RJ15071仁捷48T/96T
植物果胶酶(pectinase)ELISA试剂盒RJ21789仁捷48T/96T
植物果糖-1,6-二磷酸酶(FBP)ELISA试剂盒RJ21930仁捷48T/96T
猪肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒RJ18401仁捷48T/96T
鱼(鲑鱼)瘦素(LEP)ELISA试剂盒RJ21507仁捷48T/96T
大鼠膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA试剂盒RJ16044仁捷48T/96T
人纽蛋白(VCL)ELISA试剂盒RJ13586仁捷48T/96T
大鼠甲状腺转录因子1(TTF1)ELISA试剂盒RJ15843仁捷48T/96T
人卵巢癌抗原X1(OVX1)ELISA试剂盒RJ13381仁捷48T/96T
犬肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA试剂盒RJ19673仁捷48T/96T
猪内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒RJ18564仁捷48T/96T
小鼠细胞外信号调节激酶(ERK)ELISA试剂盒RJ17708仁捷48T/96T
猪载脂蛋白B(APOB)ELISA试剂盒RJ18789仁捷48T/96T
绵羊抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒RJ20010仁捷48T/96T
马Ⅱ型前胶原氨基端原肽(PⅡNT)ELISA试剂盒RJ19434仁捷48T/96T
大鼠破骨细胞分化因子(ODF)ELISA试剂盒RJ16116仁捷48T/96T
小鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒RJ17945仁捷48T/96T
人促酰化蛋白(ASP)ELISA试剂盒RJ12084仁捷48T/96T
豚鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒RJ18133仁捷48T/96T
牛载脂蛋白C2(apo-C2)ELISA试剂盒RJ19383仁捷48T/96T
大鼠I型胶原(Col I)ELISA试剂盒RJ15242仁捷48T/96T
小鼠可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA试剂盒RJ17349仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)