ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
猪内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
猪内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒其他产品信息:
犬白细胞介素4(IL-4)ELISA试剂盒RJ19615仁捷48T/96T
犬肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA试剂盒RJ19717仁捷48T/96T
牛I型胶原(ColI)ELISA试剂盒RJ18879仁捷48T/96T
人异常凝血酶原(APT)ELISA试剂盒RJ14678仁捷48T/96T
人尿吡啶啉(PYD)ELISA试剂盒RJ13531仁捷48T/96T
兔基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒RJ21116仁捷48T/96T
人磷酸苷油酸脱氢酶(GADPH)ELISA试剂盒RJ13297仁捷48T/96T
植物NADP苹果酸酶(NADP-ME)ELISA试剂盒RJ21747仁捷48T/96T
人Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)ELISA试剂盒RJ11182仁捷48T/96T
大鼠CD4分子(CD4)ELISA试剂盒RJ15195仁捷48T/96T
犬三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒RJ19793仁捷48T/96T
大鼠转录因子T-bet(T-bet)ELISA试剂盒RJ16648仁捷48T/96T
人糖皮质激素受体β(GR-β)ELISA试剂盒RJ14053仁捷48T/96T
人双糖链蛋白聚糖(biglycan)ELISA试剂盒RJ13929仁捷48T/96T
人酪氨酸蛋白激酶受体TYRO3(TYRO3)ELISA试剂盒RJ13238仁捷48T/96T
小鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA试剂盒RJ16843仁捷48T/96T
人血管紧张素Ⅰ(Ang-I)ELISA试剂盒RJ14400仁捷48T/96T
鱼透明质酸(HA)ELISA试剂盒RJ21668仁捷48T/96T
小鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒RJ17776仁捷48T/96T
人前列腺素H2(PGH2)ELISA试剂盒RJ13654仁捷48T/96T
人泌乳素ELISA试剂盒RJ13420仁捷48T/96T
小鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒RJ17139仁捷48T/96T
大鼠甘氨酸(Gly)ELISA试剂盒RJ15663仁捷48T/96T
牛前列腺素F2α(PGF2α)ELISA试剂盒RJ19204仁捷48T/96T
鸡流行性乙型脑炎抗体IgG(JEIgG)ELISA试剂盒RJ20474仁捷48T/96T
大鼠甘胆酸ELISA试剂盒RJ16692仁捷48T/96T
小鼠肌钙蛋白T(Tn-T)ELISA试剂盒RJ17215仁捷48T/96T
小鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒RJ16748仁捷48T/96T
豚鼠Bcl-2相关死亡促进因子(BAD)ELISA试剂盒RJ18003仁捷48T/96T
豚鼠白细胞介素10(IL-10)ELISA试剂盒RJ18023仁捷48T/96T
兔可溶性血栓调节蛋白(sTM)ELISA试剂盒RJ21158仁捷48T/96T
大鼠noggin蛋白(NOG)ELISA试剂盒RJ15268仁捷48T/96T
人胰岛细胞抗体(ICA)ELISA试剂盒RJ14605仁捷48T/96T
人丙型肝炎病毒(HCV)ELISA试剂盒RJ11939仁捷48T/96T
犬结合珠蛋白(Hpt)ELISA试剂盒RJ19738仁捷48T/96T
牛1磷脂酰肌醇4,5二磷酸磷酸二酯酶ζ1(PLCZ1)ELISA试剂盒RJ19429仁捷48T/96T
人膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA试剂盒RJ13473仁捷48T/96T
小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA试剂盒RJ16722仁捷48T/96T
大鼠前列腺素ELISA试剂盒RJ16131仁捷48T/96T
小鼠CD40分子(CD40)ELISA试剂盒RJ16762仁捷48T/96T
小鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISA试剂盒RJ17181仁捷48T/96T
山羊瓜氨酸ELISA试剂盒RJ20138仁捷48T/96T
人电子转运黄素蛋白泛醌氧化还原酶/电子转运黄素蛋白脱氢酶(ETFDH)ELISA试剂盒RJ12215仁捷48T/96T
大鼠他克莫司(FK506)ELISA试剂盒RJ16260仁捷48T/96T
猪c-fos()ELISA试剂盒RJ18230仁捷48T/96T
人血管内皮超极化因子(EDHF)ELISA试剂盒RJ14414仁捷48T/96T
大鼠反三碘甲状腺原氨酸(rT3)ELISA试剂盒RJ15633仁捷48T/96T
人β防御素104(DEFB104A)ELISA试剂盒RJ11691仁捷48T/96T
兔结合珠蛋白(Hpt;HP)ELISA试剂盒RJ21134仁捷48T/96T
犬肌酐(Cr)ELISA试剂盒RJ19715仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)