ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
兔子肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
兔子肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒其他产品信息:
大鼠层粘连蛋白(LN)ELISA试剂盒RJ15519仁捷48T/96T
小鼠蛋白激酶A(PKA)ELISA试剂盒RJ17052仁捷48T/96T
猪组蛋白H3(H3)ELISA试剂盒RJ18836仁捷48T/96T
人血小板膜糖蛋白Ⅱb;Ⅲa抗体(GP;ⅡbⅢa-Ab)ELISA试剂盒RJ14520仁捷48T/96T
人N甲基D天冬氨酸受体(NMDAR)ELISA试剂盒RJ11488仁捷48T/96T
鸡可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒RJ20459仁捷48T/96T
小鼠神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒RJ17576仁捷48T/96T
人磷脂转移蛋白(PLTP)ELISA试剂盒RJ13343仁捷48T/96T
豚鼠血红蛋白(HB)ELISA试剂盒RJ18127仁捷48T/96T
人轮状病毒抗原ELISA检测试剂盒(定性)RJ13393仁捷48T/96T
植物异柠檬酸脱氢酶(ICD)ELISA试剂盒RJ21904仁捷48T/96T
猴肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒RJ20849仁捷48T/96T
人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA试剂盒RJ13943仁捷48T/96T
兔钙蛋白酶(Calpain)ELISA试剂盒RJ21054仁捷48T/96T
小鼠血清一氧化氮(NO)ELISA试剂盒RJ17797仁捷48T/96T
猪8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒RJ18211仁捷48T/96T
猴循环免疫复合物(CIC)ELISA试剂盒RJ20841仁捷48T/96T
兔子结缔组织生长因子(CTGF)ELISA试剂盒RJ21403仁捷48T/96T
人N(ε)羧乙基赖氨酸(CEL)ELISA试剂盒RJ11472仁捷48T/96T
大鼠低氧诱导因子-2α(HIF-2α)ELISA试剂盒RJ15595仁捷48T/96T
大鼠甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)ELISA试剂盒RJ15831仁捷48T/96T
人白三烯B5(LTB5)ELISA试剂盒RJ11794仁捷48T/96T
大鼠α1抗胰蛋白酶(α1AT)ELISA试剂盒RJ15340仁捷48T/96T
土壤碱性磷酸酶ELISA试剂盒RJ22278仁捷48T/96T
犬白介素11(IL11)ELISA试剂盒RJ19597仁捷48T/96T
牛骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒RJ19057仁捷48T/96T
大鼠脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA试剂盒RJ16053仁捷48T/96T
大鼠I型前胶原羧基端肽(PICP)ELISA试剂盒RJ15247仁捷48T/96T
牛甘丙肽(GAL)ELISA试剂盒RJ19033仁捷48T/96T
小鼠凝血酶受体(TR)ELISA试剂盒RJ17475仁捷48T/96T
大鼠肿瘤标志物(CA724)ELISA试剂盒RJ16621仁捷48T/96T
人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)ELISA试剂盒RJ13103仁捷48T/96T
小鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA试剂盒RJ17157仁捷48T/96T
兔肝脂酶(HL)ELISA试剂盒RJ21062仁捷48T/96T
猪成纤维细胞生长因子2(FGF-2)ELISA试剂盒RJ18330仁捷48T/96T
猪组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)ELISA试剂盒RJ18841仁捷48T/96T
猪心钠肽(ANP)ELISA试剂盒RJ18694仁捷48T/96T
鸡MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA试剂盒RJ20281仁捷48T/96T
小鼠成纤维生长因子21(FGF21)ELISA试剂盒RJ17987仁捷48T/96T
兔一氧化氮合成酶(NOS)ELISA试剂盒RJ21308仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)