ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
大鼠可溶性白细胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
大鼠可溶性白细胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒其他产品信息:
人缺血修饰白蛋白(IMA)ELISA试剂盒RJ13724仁捷48T/96T
人热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒RJ13729仁捷48T/96T
犬风湿因子(RF)ELISA试剂盒RJ19749仁捷48T/96T
人组蛋白脱乙酰基酶7(HDAC7)ELISA试剂盒RJ14965仁捷48T/96T
大鼠谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒RJ15705仁捷48T/96T
人α-微管蛋白(α-tubulin)ELISA试剂盒RJ11663仁捷48T/96T
人精脒/精胺N(1)乙酰转移酶样蛋白1(SATL1)ELISA试剂盒RJ12876仁捷48T/96T
绵羊成纤维细胞生长因子23(FGF23)ELISA试剂盒RJ19975仁捷48T/96T
牛C肽(CPeptide)ELISA试剂盒RJ18875仁捷48T/96T
人白细胞介素12(IL-12)ELISA试剂盒RJ11810仁捷48T/96T
小鼠磷脂酰丝氨酸(PS)ELISA试剂盒RJ17415仁捷48T/96T
猪血管紧张素转化酶2(ACE2)ELISA试剂盒RJ18706仁捷48T/96T
人激肽释放酶11(KLK11)ELISA试剂盒RJ12746仁捷48T/96T
植物尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGP)ELISARJ21837仁捷48T/96T
鸡脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒RJ20495仁捷48T/96T
鱼磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(pACCase)ELISA试剂盒RJ21612仁捷48T/96T
人强啡肽(Dyn)ELISA试剂盒RJ13666仁捷48T/96T
人胃内因子(GIF)ELISA试剂盒RJ14174仁捷48T/96T
大鼠胰岛素原(PI)ELISA试剂盒RJ16523仁捷48T/96T
人G蛋白偶联受体152(GPR152/PGR5)ELISA试剂盒RJ11414仁捷48T/96T
猴促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒RJ20787仁捷48T/96T
小鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒RJ17253仁捷48T/96T
猪凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA试剂盒RJ18370仁捷48T/96T
牛精氨酸酶1(Arg-1)ELISA试剂盒RJ19125仁捷48T/96T
人脂联素(Adiponectin/Acrp30)ELISA试剂盒RJ14822仁捷48T/96T
人妊娠疱疹抗体(HG)ELISA试剂盒RJ13742仁捷48T/96T
牛二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒RJ19017仁捷48T/96T
猴肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒RJ20849仁捷48T/96T
人α1防御素(DEFA1)ELISA试剂盒RJ11623仁捷48T/96T
大鼠胃泌素抑制肽(GIP)ELISA试剂盒RJ16689仁捷48T/96T
鸡肾上腺素(EPI)ELISA试剂盒RJ20534仁捷48T/96T
人未磷酸化胰岛素生长因子结合蛋白-1ELISA试剂盒RJ14157仁捷48T/96T
人1-3-β-D葡聚糖(1,3-β-DG)ELISA试剂盒RJ15019仁捷48T/96T
人β抑制蛋白2(ARRB2)ELISA试剂盒RJ11719仁捷48T/96T
大鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA试剂盒RJ16263仁捷48T/96T
人可溶性CD100(sCD100)ELISA试剂盒RJ13130仁捷48T/96T
鸡胰高血糖素(GC)ELISA试剂盒RJ20606仁捷48T/96T
兔子肌钙蛋白C(TnC)ELISA试剂盒RJ21397仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)