ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
兔硫酸角质素(KS)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
兔硫酸角质素(KS)ELISA试剂盒其他产品信息:
人呼吸道合胞病毒IgG抗体ELISA检测试剂盒(定性)RJ12635仁捷48T/96T
牛腹泻病毒抗体(DV-Ab)ELISA试剂盒RJ19030仁捷48T/96T
犬干扰素β(IFNβ)ELISA试剂盒RJ19676仁捷48T/96T
牛10kDa干扰素γ诱导蛋白(IP10)ELISA试剂盒RJ18854仁捷48T/96T
猪泛素(Ub)ELISA试剂盒RJ18383仁捷48T/96T
人果糖二磷酸醛缩酶A(ALDOA)ELISA试剂盒RJ12562仁捷48T/96T
人血管抑素/血管稳定蛋白(angiostatin)ELISA试剂盒RJ14455仁捷48T/96T
兔子Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)ELISA试剂盒RJ21356仁捷48T/96T
小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP6)ELISA试剂盒RJ17842仁捷48T/96T
人抗细胞膜DNA抗体(cmDNA)ELISA试剂盒RJ13070仁捷48T/96T
小鼠磷酸二酯酶3B(PDE3B)ELISA试剂盒RJ17393仁捷48T/96T
人游离血红蛋白(f-Hb)ELISA试剂盒RJ14730仁捷48T/96T
人精氨酸代琥珀酸裂解酶(ASL)ELISA试剂盒RJ12868仁捷48T/96T
兔8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒RJ20905仁捷48T/96T
人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)ELISA试剂盒RJ12336仁捷48T/96T
小鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒RJ16925仁捷48T/96T
小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒RJ17474仁捷48T/96T
牛组蛋白去乙酰化酶10ELISA试剂盒RJ19416仁捷48T/96T
人血红素加氧酶2(HO2)ELISA试剂盒RJ14465仁捷48T/96T
鱼睾酮(T)ELISA试剂盒RJ21574仁捷48T/96T
大鼠甲壳质酶蛋白40(YKL-40)ELISA试剂盒RJ15828仁捷48T/96T
大鼠组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒RJ16670仁捷48T/96T
大鼠肾损伤分子1(Kim-1)ELISA试剂盒RJ16210仁捷48T/96T
大鼠糖化蛋白(GSP)ELISA试剂盒RJ16268仁捷48T/96T
小鼠可溶性MHC-I链相关基因A(sMICA)ELISA试剂盒RJ17354仁捷48T/96T
牛泛素(Ub)ELISA试剂盒RJ19021仁捷48T/96T
人凋亡相关因子(Fas)ELISA试剂盒RJ12223仁捷48T/96T
犬10kDa干扰素γ诱导蛋白(IP10)ELISA试剂盒RJ19545仁捷48T/96T
仓鼠白介素1β(IL1β)ELISA试剂盒RJ18158仁捷48T/96T
牛丙酸ELISA试剂盒RJ18967仁捷48T/96T
人层粘连蛋白(LN)ELISA试剂盒RJ11991仁捷48T/96T
兔子抗凝血酶Ⅲ抗体(ATⅢAb)ELISA试剂盒RJ21408仁捷48T/96T
兔5核苷酸酶(5-NT)ELISA试剂盒RJ20902仁捷48T/96T
植物己糖激酶(HK)ELISA试剂盒RJ21812仁捷48T/96T
人普通急性淋巴细胞白血病抗原(CALLA)ELISA试剂盒RJ13633仁捷48T/96T
人β-联蛋白(β-Catenin)ELISA试剂盒RJ11702仁捷48T/96T
牛羧化不全骨钙素(ucOC)ELISA试剂盒RJ19260仁捷48T/96T
人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒RJ13794仁捷48T/96T
人痕量胺关联受体6(TAAR6)ELISA试剂盒RJ12624仁捷48T/96T
小鼠钙结合蛋白(CR)ELISA试剂盒RJ17106仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)