ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
犬缓激肽(BK)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
犬缓激肽(BK)ELISA试剂盒其他产品信息:
小鼠巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA试剂盒RJ17296仁捷48T/96T
大鼠三叶因子3(TFF3)ELISA试剂盒RJ16179仁捷48T/96T
人皮肤蛋白(DPT)ELISA试剂盒RJ13599仁捷48T/96T
裸鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)ELISA试剂盒RJ18197仁捷48T/96T
人落叶型天疱疮抗体(PF)ELISA试剂盒RJ13397仁捷48T/96T
小鼠肝再生增强因子(ALR)ELISA试剂盒RJ17117仁捷48T/96T
人细胞周期蛋白A1(CCNA1)ELISA试剂盒RJ14242仁捷48T/96T
人细胞角蛋白17(CK17)ELISA试剂盒RJ14214仁捷48T/96T
大鼠I型原胶原N端前肽(PINP)ELISA试剂盒RJ15248仁捷48T/96T
大鼠总甲状腺激素(TT4)ELISA试剂盒RJ16657仁捷48T/96T
小鼠三磷酸磷脂酰肌醇(PIP3)ELISA试剂盒RJ17557仁捷48T/96T
昆虫 多功能氧化酶(MFO)ELISA试剂盒RJ21949仁捷48T/96T
兔乙酰化饥饿激素(aGHRL)ELISA试剂盒RJ21317仁捷48T/96T
人F肌动蛋白(Factin)ELISA试剂盒RJ11401仁捷48T/96T
人15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA试剂盒RJ11123仁捷48T/96T
羊促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒RJ20233仁捷48T/96T
大鼠热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒RJ16157仁捷48T/96T
豚鼠γ干扰素诱导单核因子(MIG;CXCL9)ELISA试剂盒RJ18013仁捷48T/96T
人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA试剂盒RJ13896仁捷48T/96T
人衔接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA试剂盒RJ14287仁捷48T/96T
大鼠Acylated Ghrelin (AG)ELISA试剂盒RJ15152仁捷48T/96T
鸡促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒RJ20366仁捷48T/96T
鱼热休克蛋白HSP90α(HSP90AA1)ELISA试剂盒RJ21645仁捷48T/96T
人肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)ELISA试剂盒RJ12332仁捷48T/96T
牛黄嘌呤脱氢酶酶(XDH)ELISA试剂盒RJ19086仁捷48T/96T
猪免疫球蛋白G4(IgG4)ELISA试剂盒RJ18551仁捷48T/96T
鸡干扰素γ(IFNγ)ELISA试剂盒RJ20400仁捷48T/96T
人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βDglucosidase)ELISA试剂盒RJ15015仁捷48T/96T
植物肉桂酸-4-羟化酶(C4H)ELISA试剂盒RJ21851仁捷48T/96T
大鼠5-羟色胺受体4(5-HT4R)ELISA试剂盒RJ15102仁捷48T/96T
牛甘油三酯(TG)ELISA试剂盒RJ19037仁捷48T/96T
大鼠β-分泌酶(β-Secretase)ELISA试剂盒RJ15375仁捷48T/96T
人基膜聚糖/内腔蛋白(LUM)ELISA试剂盒RJ12707仁捷48T/96T
人白细胞介素11(IL-11)ELISA试剂盒RJ11808仁捷48T/96T
小鼠cAMP反应元件结合蛋白(CREB)ELISA试剂盒RJ16754仁捷48T/96T
人肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒RJ13858仁捷48T/96T
兔金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒RJ21136仁捷48T/96T
植物腺苷酸环化酶(AC)ELISA试剂盒RJ21884仁捷48T/96T
人周期素依赖性激酶7(CDK7)ELISA试剂盒RJ14902仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)