ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
人凝血因子Ⅷ相关抗原(Ⅷ-Ag)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
人凝血因子Ⅷ相关抗原(Ⅷ-Ag)ELISA试剂盒其他产品信息:
植物水杨酸(SA)ELISA试剂盒RJ21856仁捷48T/96T
鱼肉碱棕榈酰转移酶-1(CPT-1)ELISA试剂盒RJ21651仁捷48T/96T
小鼠整合素β1(ITGβ1)ELISA试剂盒RJ17906仁捷48T/96T
牛43kDa胶原凝集素(CL43)ELISA试剂盒RJ18857仁捷48T/96T
鸡卵粘蛋白(CHOM)ELISA试剂盒RJ20481仁捷48T/96T
猴分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)ELISA试剂盒RJ20792仁捷48T/96T
大鼠黏着斑激酶(FAK)ELISA试剂盒RJ16069仁捷48T/96T
人褪黑激素硫酸盐(Melatonin-Sulfate)ELISA试剂盒RJ14100仁捷48T/96T
人早期生长反应因子1(EGR1)ELISA试剂盒RJ14771仁捷48T/96T
绵羊基质金属蛋白酶1(MMP1)ELISA试剂盒RJ19999仁捷48T/96T
猴雄激素(androgen)ELISA试剂盒RJ20839仁捷48T/96T
猪白介素2受体α(IL2Rα)ELISA试剂盒RJ18280仁捷48T/96T
小鼠血管生成素受体酪氨酸激酶1(Tie-1)ELISA试剂盒RJ17781仁捷48T/96T
人新生儿促甲状腺素(N-TSH)ELISA试剂盒RJ14349仁捷48T/96T
人风湿因子(RF)ELISA试剂盒RJ13256仁捷48T/96T
人SARS冠状病毒IgG抗体ELISA检测试剂盒(定性)RJ11548仁捷48T/96T
大鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA试剂盒RJ15451仁捷48T/96T
小鼠谷胱甘肽巯基转移酶(GST)ELISA试剂盒RJ17155仁捷48T/96T
绵羊饥饿激素(GHRL)ELISA试剂盒RJ19997仁捷48T/96T
人CD44分子(CD44)ELISA试剂盒RJ11302仁捷48T/96T
猴肾损伤分子1(Kim-1)ELISA试剂盒RJ20830仁捷48T/96T
小鼠抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒RJ17329仁捷48T/96T
鸡血管内皮细胞粘附分子1(VCAM1/CD106)ELISA试剂盒RJ20589仁捷48T/96T
鱼磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)ELISA试剂盒RJ21613仁捷48T/96T
人含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2(Tie2)ELISA试剂盒RJ12581仁捷48T/96T
小鼠线粒体核糖体蛋白S11(MRPS11)ELISA试剂盒RJ17721仁捷48T/96T
牛乳铁传递蛋白(LTF)ELISA试剂盒RJ19226仁捷48T/96T
人脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP4)ELISA试剂盒RJ14818仁捷48T/96T
小鼠胶原酶II(CollagenaseII)ELISA试剂盒RJ17272仁捷48T/96T
人乳头状瘤病毒抗体IgM(HPV-IgM)ELISA试剂盒RJ13771仁捷48T/96T
人硬骨素(SOST)ELISA试剂盒RJ14714仁捷48T/96T
猴雌激素(E)ELISA试剂盒RJ20785仁捷48T/96T
人肌酸激酶同工酶BB(CKBB)ELISA试剂盒RJ12696仁捷48T/96T
植物海藻糖6磷酸合酶(TPS)ELISA试剂盒RJ21801仁捷48T/96T
人分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)ELISA试剂盒RJ12343仁捷48T/96T
小鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA试剂盒RJ17224仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)