ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
大鼠可溶性白细胞分化抗原30配体(sCD30L)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
大鼠可溶性白细胞分化抗原30配体(sCD30L)ELISA试剂盒其他产品信息:
人脂磷壁酸(LTA)ELISA试剂盒RJ14827仁捷48T/96T
人抗黄体生成素抗体(AntiLHAb)ELISA试剂盒RJ12983仁捷48T/96T
猪缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(AMH)ELISA试剂盒RJ18555仁捷48T/96T
人胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒RJ14582仁捷48T/96T
猪血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒RJ18734仁捷48T/96T
人补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒RJ11959仁捷48T/96T
山羊血小板因子4(PF4)ELISA试剂盒RJ20199仁捷48T/96T
人水蛭素(Hirudin)ELISA试剂盒RJ13946仁捷48T/96T
大鼠脱中胚蛋白(EOMES)ELISA试剂盒RJ16303仁捷48T/96T
羊促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒RJ20233仁捷48T/96T
人胶原凝集素(Collectin)ELISA试剂盒RJ12826仁捷48T/96T
大鼠促性腺激素释放激素受体抗体(GNRHRAb)ELISA试剂盒RJ15554仁捷48T/96T
人晚期糖基化终末产物受体(RAGE/AGER)ELISA试剂盒RJ14122仁捷48T/96T
猴Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒RJ20756仁捷48T/96T
人乙型肝炎病毒前S2抗原ELISA检测试剂盒(定性)RJ14669仁捷48T/96T
鱼脱碘酶(DID)ELISA试剂盒RJ21670仁捷48T/96T
大鼠胃泌素(Gas)ELISA试剂盒RJ16333仁捷48T/96T
牛白细胞介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒RJ18945仁捷48T/96T
牛转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒RJ19403仁捷48T/96T
牛成纤维细胞生长因子9(FGF9)ELISA试剂盒RJ18978仁捷48T/96T
人左右不对称发育因子2(LEFTY2)ELISA试剂盒RJ15009仁捷48T/96T
人载脂蛋白C1(apo-C1)ELISA试剂盒RJ14756仁捷48T/96T
人肝素结合EGF样生长因子(HBEGF)ELISA试剂盒RJ12419仁捷48T/96T
猪水通道蛋白4(AQP4)ELISA试剂盒RJ18639仁捷48T/96T
鸡抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒RJ20377仁捷48T/96T
人CD80分子(CD80/B71)ELISA试剂盒RJ11311仁捷48T/96T
山羊褪黑素(MT)ELISA试剂盒RJ20187仁捷48T/96T
人Tau181蛋白(TAU181)ELISA试剂盒RJ11572仁捷48T/96T
大鼠胰岛素自身抗体(IAA)ELISA试剂盒RJ16524仁捷48T/96T
人癌蛋白诱导转录物3(OIT3)ELISA试剂盒RJ11746仁捷48T/96T
鱼血红蛋白(Hb)ELISA试剂盒RJ21694仁捷48T/96T
山羊谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPX)ELISA试剂盒RJ20130仁捷48T/96T
大鼠乙酰CoA(acetyl-CoA)ELISA试剂盒RJ16535仁捷48T/96T
鲤鱼卵黄蛋白原(VTG)ELISA试剂盒RJ21504仁捷48T/96T
大鼠可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)ELISA试剂盒RJ15951仁捷48T/96T
大鼠基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA试剂盒RJ15812仁捷48T/96T
人脂褐素(Lipo)ELISA试剂盒RJ14819仁捷48T/96T
大鼠紧密连接蛋白(Occludin)ELISA试剂盒RJ15874仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)