ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
大鼠基质金属蛋白酶14(MMP-14)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
大鼠基质金属蛋白酶14(MMP-14)ELISA试剂盒其他产品信息:
大鼠足细胞标记蛋白;足盂蛋白(PCX)ELISA试剂盒RJ16660仁捷48T/96T
人大肠癌专一抗原3(CCSA3)ELISA试剂盒RJ12099仁捷48T/96T
小鼠脂蛋白a(Lp-a)ELISA试剂盒RJ17908仁捷48T/96T
马流感病毒(A型)(FLU-A)抗体定性ELISA试剂盒RJ19489仁捷48T/96T
小鼠肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)ELISA试剂盒RJ17931仁捷48T/96T
大鼠锌原卟啉(ZPP)ELISA试剂盒RJ16397仁捷48T/96T
猪钙/钙调素依赖性蛋白激酶2δ(CAMK2D)ELISA试剂盒RJ18396仁捷48T/96T
人尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)ELISA试剂盒RJ13534仁捷48T/96T
豚鼠碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)ELISA试剂盒RJ18079仁捷48T/96T
人抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)ELISA试剂盒RJ12997仁捷48T/96T
人口蹄疫抗体(FMDV-Ab)ELISA试剂盒RJ13222仁捷48T/96T
大鼠前列腺素ELISA试剂盒RJ16131仁捷48T/96T
大鼠串珠素(HSPG2)ELISA试剂盒RJ15533仁捷48T/96T
鸡碳酸酐酶Ⅱ(CA2)ELISA试剂盒RJ20551仁捷48T/96T
大鼠一磷酸腺苷(AMP)ELISA试剂盒RJ16506仁捷48T/96T
鹅半胱氨酸蛋白酶8(Casp-8)ELISA试剂盒RJ20717仁捷48T/96T
豚鼠神经肽Y(NPY)ELISA试剂盒RJ18108仁捷48T/96T
豚鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒RJ18041仁捷48T/96T
犬乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒RJ19897仁捷48T/96T
裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒RJ18195仁捷48T/96T
人EB病毒Zta蛋白ELISA检测试剂盒(定性)RJ11373仁捷48T/96T
小鼠硫化氢(H2S)ELISA试剂盒RJ20273仁捷48T/96T
人肠病毒(Enterovirus)ELISA试剂盒RJ12001仁捷48T/96T
大鼠血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)ELISA试剂盒RJ16445仁捷48T/96T
大鼠热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒RJ16155仁捷48T/96T
人肝脏甘油三脂脂肪酶(HTGL)ELISA试剂盒RJ12428仁捷48T/96T
猪铁调素(Hepc)ELISA试剂盒RJ18656仁捷48T/96T
人Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA试剂盒RJ11198仁捷48T/96T
鱼热休克蛋白HSP90α(HSP90AA1)ELISA试剂盒RJ21645仁捷48T/96T
小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒RJ16918仁捷48T/96T
人维生素H(VH)ELISA试剂盒RJ14147仁捷48T/96T
马维生素A(VA)ELISA试剂盒RJ19518仁捷48T/96T
植物淀粉酶(AMS)ELISA试剂盒RJ21770仁捷48T/96T
小鼠血管内皮细胞生长因子受体-3(VEGFR-3)ELISA试剂盒RJ17774仁捷48T/96T
人乙酰乙酸(ACAC)ELISA试剂盒RJ14640仁捷48T/96T
人中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)ELISA试剂盒RJ14846仁捷48T/96T
兔白细胞介素23(IL-23)ELISA试剂盒RJ20989仁捷48T/96T
人表皮角蛋白(EK)ELISA试剂盒RJ11915仁捷48T/96T
小鼠雄激素(androgen)ELISA试剂盒RJ17753仁捷48T/96T
人转录中介因子1β(TRIM28/KAP1/RNF96/TIF1B)ELISA试剂盒RJ14926仁捷48T/96T
猴外源性α干扰素(Exo-IFN-α)ELISA试剂盒RJ20834仁捷48T/96T
人骨保护素(OPG)ELISA试剂盒RJ12506仁捷48T/96T
大鼠纤维蛋白原(FIB)ELISA试剂盒RJ16372仁捷48T/96T
大鼠胰蛋白酶(trypsin)ELISA试剂盒RJ16510仁捷48T/96T
大鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA试剂盒RJ16276仁捷48T/96T
鸡磷酸化P38(P-P38)ELISA试剂盒RJ20467仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)