ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
大鼠心钠素(ANF)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
大鼠心钠素(ANF)ELISA试剂盒其他产品信息:
人组织蛋白酶V(CTSV)ELISA试剂盒RJ14985仁捷48T/96T
小鼠CD8分子(CD8)ELISA试剂盒RJ16765仁捷48T/96T
大鼠钙非依赖型磷脂酶A2(iPLA2)ELISA试剂盒RJ15653仁捷48T/96T
人白细胞介素9(IL-9)ELISA试剂盒RJ11854仁捷48T/96T
人丁型肝炎IgM(HDVIgM)ELISA试剂盒RJ12233仁捷48T/96T
昆虫羧酸酯酶(CES)ELISA试剂盒RJ21972仁捷48T/96T
人低氧诱导因子-2α(HIF-2α)ELISA试剂盒RJ12206仁捷48T/96T
大鼠磷酸化酪氨酸激酶(p-TrK)ELISA试剂盒RJ15997仁捷48T/96T
人糖抗原199(CA199)ELISA试剂盒RJ14045仁捷48T/96T
人血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)ELISA试剂盒RJ14445仁捷48T/96T
人抗肾小球基底膜抗体(GBM-Ab)ELISA试剂盒RJ13052仁捷48T/96T
山羊孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒RJ20209仁捷48T/96T
牛α1微球蛋白(α1M)ELISA试剂盒RJ18895仁捷48T/96T
人60S核糖体蛋白L17(RPL17)ELISA试剂盒RJ11161仁捷48T/96T
牛促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒RJ18991仁捷48T/96T
小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βDglucosidase)ELISA试剂盒RJ17978仁捷48T/96T
人白细胞介素5(IL-5)ELISA试剂盒RJ11849仁捷48T/96T
小鼠白细胞介素31(IL-31)ELISA试剂盒RJ16952仁捷48T/96T
牛α2纤溶酶抑制因子(α2PI)ELISA试剂盒RJ18898仁捷48T/96T
马吲哚胺2,3双加氧酶1(IDO1)ELISA试剂盒RJ19544仁捷48T/96T
人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒RJ11706仁捷48T/96T
人血管生成素受体Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA试剂盒RJ14443仁捷48T/96T
微生物磷酸果糖激酶(PFK)ELISA试剂盒RJ21994仁捷48T/96T
大鼠Ⅰ型胶原(COL1)ELISA试剂盒RJ15121仁捷48T/96T
大鼠D二聚体(D2D)ELISA试剂盒RJ15224仁捷48T/96T
绵羊结构型一氧化氮合酶(cNOS)ELISA试剂盒RJ20007仁捷48T/96T
人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒RJ14913仁捷48T/96T
小鼠α半乳糖基抗原(αGal)ELISA试剂盒RJ16858仁捷48T/96T
人DNA甲基转移酶1(DNMT1)ELISA试剂盒RJ11354仁捷48T/96T
猪1,25二羟基维生素D3(1,25DHVD3)ELISA试剂盒RJ18845仁捷48T/96T
鸡白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒RJ20329仁捷48T/96T
小鼠Ⅱ型胶原(ColⅡ)ELISA试剂盒RJ16736仁捷48T/96T
大鼠非酰基化Ghrelin(NAG)ELISA试剂盒RJ15637仁捷48T/96T
牛血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP1)ELISA试剂盒RJ19334仁捷48T/96T
人信号素3A(SEMA3A)ELISA试剂盒RJ14361仁捷48T/96T
仓鼠Na-K-ATP酶(Na-K-ATPase)ELISA试剂盒RJ18155仁捷48T/96T
人脂褐质(LF)ELISA试剂盒RJ14820仁捷48T/96T
兔天门冬氨酸氨基转移酶(AST)ELISA试剂盒RJ21246仁捷48T/96T
绵羊甘油醛3磷酸脱氢酶(GAPDH)ELISA试剂盒RJ19987仁捷48T/96T
小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA试剂盒RJ17838仁捷48T/96T
羊传染性胸膜肺炎(pleuropneumonia)ELISA试剂盒RJ20232仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)