ELISA检测试剂盒检测范围:人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
大鼠信号转导分子7(Smad7)ELISA试剂盒特点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、节省实验经费。
大鼠信号转导分子7(Smad7)ELISA试剂盒其他产品信息:
人抗纺锤体抗体(MSA)ELISA试剂盒RJ12951仁捷48T/96T
猪半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(CST3)ELISA试剂盒RJ18304仁捷48T/96T
山羊白细胞介素10(IL-10)ELISA试剂盒RJ20097仁捷48T/96T
鸡弓形虫循环抗原(TCA)ELISA试剂盒RJ20406仁捷48T/96T
人军团菌抗体IgM(LPAb-IgM)ELISA试剂盒RJ12913仁捷48T/96T
小鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β;CCL19)ELISA试剂盒RJ17300仁捷48T/96T
鱼瘦素(LEP)ELISA试剂盒RJ21661仁捷48T/96T
人CD14分子(CD14)ELISA试剂盒RJ11286仁捷48T/96T
人H-rasELISA试剂盒RJ11421仁捷48T/96T
大鼠氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)ELISA试剂盒RJ15406仁捷48T/96T
犬循环免疫复合物(CIC)ELISA试剂盒RJ19881仁捷48T/96T
大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)ELISA试剂盒RJ16632仁捷48T/96T
鱼α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒RJ21526仁捷48T/96T
人活化素受体样激酶1(ALK1)ELISA试剂盒RJ12675仁捷48T/96T
大鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒RJ15681仁捷48T/96T
人精子顶体酶(Sperm acrosin)ELISA试剂盒RJ12878仁捷48T/96T
犬催乳素(PRL)ELISA试剂盒RJ19652仁捷48T/96T
犬肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA试剂盒RJ19717仁捷48T/96T
犬血清淀粉样蛋白A2(SAA2)ELISA试剂盒RJ19872仁捷48T/96T
人胎儿血红蛋白(HBF)ELISA试剂盒RJ14005仁捷48T/96T
鸡CXC趋化因子配体2(CXCL2)ELISA试剂盒RJ20271仁捷48T/96T
猪黑素皮质素受体2(MC2R)ELISA试剂盒RJ18443仁捷48T/96T
小鼠G蛋白偶联受体40(GPR40)ELISA试剂盒RJ16793仁捷48T/96T
植物玉米素核苷(ZR)ELISA试剂盒RJ21917仁捷48T/96T
人细胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA试剂盒RJ14221仁捷48T/96T
兔子谷胱甘肽还原酶(GR)ELISA试剂盒RJ21389仁捷48T/96T
猪乙型脑炎抗体ELISA检测试剂盒(定性)RJ18766仁捷48T/96T
兔白介素12(IL12/P70)ELISA试剂盒RJ20973仁捷48T/96T
人腺病毒7型IgG抗体ELISA检测试剂盒(定性)RJ14296仁捷48T/96T
猴子风湿因子(RF)ELISA试剂盒RJ20870仁捷48T/96T
大鼠CD25分子(CD25)ELISA试剂盒RJ15185仁捷48T/96T
人转甲状腺素蛋白(TTR)ELISA试剂盒RJ14919仁捷48T/96T
牛硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)ELISA试剂盒RJ19373仁捷48T/96T
鹅总蛋白(TP)ELISA试剂盒RJ20752仁捷48T/96T
大鼠胰岛素受体底物2(IRS2)ELISA试剂盒RJ16516仁捷48T/96T
人黄体生成素(LH)ELISA试剂盒RJ12662仁捷48T/96T
小鼠甘油二酯(DAG)ELISA试剂盒RJ17111仁捷48T/96T
大鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)ELISA试剂盒RJ16067仁捷48T/96T
人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒RJ13794仁捷48T/96T
大鼠睫状神经营养因子(CNTF)ELISA试剂盒RJ15869仁捷48T/96T
猪游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒RJ18772仁捷48T/96T
人15epi氧脂素A4(15epiLXA4)ELISA试剂盒RJ11121仁捷48T/96T

样本处理方法汇总表及计算解析
一、液体样本
液体样本处理原则:所有的液体样本,用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),如果以后碰到其他的液体样本,也按这个方法,纳入汇总表。
1、血清:用无菌管收集,室温血液自然凝固10-20分钟,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2、血浆:应根据标本的要求选择EDTA、肝素钠或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3、尿液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4、胸腹水:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5、脑脊液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6、唾液:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
7、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
8、牛奶:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
9、蜂蜜:用无菌管收集,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
10、全血:用含有抗凝剂的无菌管收集,立即轻轻摇动,来回轻轻颠倒数次,使血液和抗凝剂混匀,以防血液凝固。
二、固体样本
固体样本处理原则:称取1g的固体样本,用9g的合适缓冲液溶解,分泌蛋白可以直接离心取上清检测,细胞内的蛋白,要先收集细胞,再用合适方法破碎,离心取上清测试。
1、组织标本:切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。对于植物组织,不好匀浆的话,就在液氮中充分研磨;
2、细胞内蛋白样本
许多待测蛋白不是分泌蛋白,而是存在于细胞内的蛋白,这个时候,要先收集细胞,洗涤干净,再破碎细胞,离心取上清。
(1)培养的细胞
A、动物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融(如果反复冻融,破碎效果不好,就采用超声波破碎),以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
B、植物细胞:用PH7.2⁻⁷.4的PBS稀释细胞悬液,使细胞浓度达到100万/ml左右,置于冰盒上,用超声破碎仪,设置破碎2s,冷却30s的方式,充分破碎细胞,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)组织的细胞
切割标本后,称取1g组织,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),去除上清,再用pH7.2⁻⁷.4左右的PBS小心洗涤沉淀的细胞三遍。再用上述的细胞破碎方法破碎细胞。
3、土壤:称取1g土壤,加入9g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,用手工将标本充分混匀。2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2⁻⁷.4左右的PBS,溶解咽拭子头部,摇匀,用镊子取出咽拭子并挤干液体,2-8℃条件离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。分装一份待检测,其余冷冻备用,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。如果是测分泌蛋白,直接取上清检测,测试细胞内蛋白,要破碎细胞。
5.植物标本中相关酶或蛋白的测定:(粗提取)
1、 新鲜植物组织请在液氮中充分研磨;
2、 加入样品体积9倍的提取液(pH 7.4 PBS缓冲液),3、 请于4度,8000rpm,离心30分钟,取上清并暂时保存于4度待用。
三、样本收集注意事项
1、不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
2、标本采集后尽快进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
3、我们罗列的是通用的样本处理方法,无法涵盖各种样本,对于一些特殊样本,建议实验人员多参考已发表的文献,自行设计合理的样本处理方法。
计算方法示例:绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。将样本的OD值为X值代入方程式,所得的Y值即是我们的样本值。(如上图所示)