过氧化物酶试剂盒

过氧化物酶试剂盒 微量法产品内容：

提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；试剂一：液体 20mL×1 瓶，4℃保存；

试剂二：液体×1 瓶，4℃保存；用时每瓶加入 3mL 试剂一，充分溶解待用；用不完的试剂 4℃保存一周。

试剂三：液体 3mL×1 瓶，4℃保存。

过氧化物酶试剂盒 微量法产品简介：

POD（EC 1.11.1.7）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物，具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。

POD 催化 H₂O₂ 氧化特定底物，在 470nm 有特征光吸收。

过氧化物酶试剂盒 微量法试验中所需的仪器和试剂：

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水

过氧化物酶试剂盒 微量法操作步骤：

一、粗酶液提取：

1、细菌、细胞或组织样品的制备

收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20%或 200W，超声 3 秒，间隔 10 秒。重复 30 次）；8000g 4℃离心 10

分钟，取上清，置冰上待测。

称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10 分钟，取上清，置冰上待

测。

2、血清（浆）样品：直接检测。

二、POD 测定操作表

1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 470nm，蒸馏水调零。

2、测定前将试剂一、二和三在 37℃（哺乳动物）或 25℃（其他物种）放置 10min 以上。

3、样本测定表

在微量石英比色皿或 96 孔板中按顺序加入上述试剂，立即混匀并计时，记录 470nm 下 30s 时的吸光值 A1 和 1min30s 后的吸光值 A2。计算 A=A2-A1。

注意：若一次性测定样本较多，可将试剂一、二、三和蒸馏水按比例配成混合液，在 37℃（哺乳动物）或 25℃（其他物种）放置 10min 以上，测定时加入 240μ L 混合液和 10μ L 样本测定。如果小于 0.005 可将反应时间延长到 5min，如果大于 0.5 可将样本用提取液稀释后测定并乘以相应倍数。